Ma hûn hîn jî Trizol bikar tînin ku RNA derxin?
Xwede, bila ez xema saxlemiya te nekim!
Trizol ber bi marjînalbûnê ve diçe, ma nebêje tu hîn di tariyê de yî?

Hêmana sereke ya reagenta Trizol fenol e, û reagentên organîk ên wekî kloroform jî di operasyona ceribandinê de têne zêdekirin.Ragihandina demdirêj dê zirarê bide tenduristiya we, nemaze têkiliya rasterast a çerm dikare bibe sedema şewitandinên kîmyewî yên giran û şopên mayînde.

Di bin şert û mercên normal de, hevkarên laboratûwarê tenê dikarin xetereyan kêm bikin bi tam çekdarkirina xwe (lixwekirina kincên laboratuarê, destik û maskeyan).

Û şîreta min ji we re ev e: ji kerema xwe rasterast Trizol biguhezînin da ku ji çavkaniyê zirarê nebînin.

1. Berhema nifşa yekem a derxistina RNA
Di 1987 de derketin (reagentên Trizol)

berjewendî:
Hilberîna bêkêmasî

Kêmasî:
Reagentên toksîk ên wekî guanidine isothiocyanate-fenol-chloroform hewce ne;
Operasyona giran;
Pêdivî ye ku DNase bikar bînin da ku qirêjiya DNA jêbirin

2.Berhema nifşa duyemîn a derxistina ARNyê
Di 1994 de derkeve (QIAGEN RNeasy û piraniya hilberên navxweyî)

berjewendî:
Rêbaza centrifûgal a stûnê tête pejirandin, ku xebitandina wê hêsan e;

Lidijî:
Pêdivî ye ku santrîfuj bikin da ku bermahiyên tevnê jê bibin
Pêdivî ye ku DNase bikar bînin da ku qirêjiya DNA jêbirin

3.Hilbera nifşa sêyemîn a derxistina RNA
Di 2005 de derket (QIAGEN RNeasy Plus û ForegeneBerhemên rêza paqijkirina RNA)

berjewendî:
Rasterast stûna rakirina DNA-yê bikar bînin da ku di heman demê de bermayiyên DNA û tevnvîsê derxînin, dem û hewldanê xilas bikin;
Ewle û rehet, ne hewce ye ku stûna parzûnê û DNase lê zêde bikin da ku bi hêsanî nepaqijiyan rakin û ji gemariya DNA-yê dûr bixin.

Ka em li cûdahiyên xebitandinê yên di navbera hilbera nifşa yekem (Trizol), hilbera nifşê duyemîn (RNeasy) û hilbera nifşa sêyemîn (Foregene) ya derxistina RNA de binihêrin:

Operasyona di jimarê de zelal e: hilbera nifşa sêyemîn xwedan avantajên eşkere ye

Tenê sê peyvan ji bo danasînê: hêsan!Zû!Ewlekarî

Nexşeya PK ya encamên ceribandinêboBerhemên nifşê yekem, nifşê duyemîn û nifşê sêyemîn derxistina RNA:

1. Electrophoretogram

Nifşa yekem (1: Trizol)
Nifşa duyemîn (2: QIAGEN RNeasy)
Nifşa sêyemîn (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

Çi celeb hilberek baş e, hûn ê bi berhevdanê zanibin
ARN bi bikaranîna kîta Foregene hatiye derxistin
Ne tenê konsantasyona bilind lê di heman demê de yekitiya baş jî

Grafika 2.qPCR (grafika kemera zêdekirinê)

Nifşê yekem (Trizol)

Nifşa duyemîn (şîna ezmanîwateyaQIAGEN RNeasy-, sorwateyaQIAGEN RNeasy +)

Nifşa sêyemîn (şîn tê wateya Foregene, kesk tê wateya QIAGEN RNeasy plus)

(Têbînî: grafika QIAGEN RNeasy ya nifşê duyemîn a qPCR tê vê wateyê ku kît DNase zêde nake û gemariya DNA jê nake. Ji ber vê yekê, CT bilindtir e û encam ne rast e; QIAGEN RNeasy + tê wateya ku DNase hatiye zêdekirin û gemariya DNA-yê ji holê hatiye rakirin, û encam rast e)

Ka ew elektroforetogramek be an grafîkek quntara zêdekirina PCR-ya jimareyî be, kalîteya hilberên Foregene ji hilberên biyanî yên biyanî ne kêmtir e.