Analîzên jêrîn ên pirsgirêkên gengaz ên di nav deBuccalswab/FTA card DNA extraction is helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali:Tech@foregene.com.

Stûna paqijkirinê xitimî ye

Di vê kîtê de, di operasyona derxistina DNA ya genomîk de, stûna paqijkirinê rasterast li ser tevlêbûna lîza enzîmatîk a nimûneyê bêyî gavavêtina santrîfugê tê vegirtin, û stûna paqijkirinê dibe ku ji ber enzîmkirina bêkêmasî û vîskozîteya bilind a nimûneyê were asteng kirin.

Sedemên gengaz ên jêrîn ev in:

1. Netemamkirina enzîma ya nimûneyên tevnê.

Pêşniyar: Dema hilberandina nimûneyê ya Foregene Protease dikare bi rêkûpêk were dirêj kirin an jî supernatant dikare piştî santrîfujasyonê di 12,000 rpm (~ 13,400) de were girtin.× g) ji bo 5 min.

2. Bikaranîna zêde ya nimûneyên tevnvîsê an jî tevnên mezin.

Pêşniyar: Çêtir e ku ji 1 zêde nebeBuccal swab di nimûneyê de;heke nimûne pir mezin be, li gorî vê dosyaya Buffer ST1, Foregene Protease, tampon ST2 zêde bikin.

3. Vîskozîteya nimûneyê pir zêde ye.

Pêşniyar: Nimûn dikarin bi guncan bi 10 mM Tris-HCl berî derxistina ADN-ya genomîk werin rijandin.

4. Parçeyên karta xwînê hatine mêjkirin.

Pêşniyar: Dema santrîfujasyonê ya demkî ya gava 6-ê ya derxistina genomîkî ya xala xwînê (Kerta FTA) dikare bi guncan were dirêj kirin.

Hilberîna kêm an tunebûna DNA

Bi gelemperî cûrbecûr faktor hene ku bandorê li hilberîna DNA ya genomî dikin, di nav de eslê nimûneyê, şertên hilanîna nimûneyê, amadekirina nimûneyê, manipulasyon, hwd.

Di dema derxistinê de ADNya genomî nayê bidestxistin

Sedemên gengaz wiha ne:

1. Parastina nerast a nimûneyan an hilanînê ji bo pir dirêj dibe sedema hilweşîna DNA ya genomîk.

Pêşniyar: Divê şûşeyên devkî yên devkî ji nû ve bên ceribandin, û nayê şîret kirin ku ji bo operesyonên derxistina DNA-ya genomîk şûşeyên parastî bikar bînin;Nimûneyên deqên xwînê divê piştrast bikin ku kalîte jêhatî ye û dema hilanînê divê pir dirêj nebe.

2. Bikaranîna pir hindik tevnê dibe ku bibe sedema nederxistina DNAya genomîk a têkildar.

Pêşniyar: BişopîninbuccaDi rêberê operasyonê de rêwerzên nimûneyên şûşê bişixulînin, û bi qasî ku pêkan dibe bila bibe, şaneyên têra xwe ji bo derxistina DNA ya genomî bi sûpa devkî ve werin girêdan;ji bo derxistina nimûneya lekeya xwînê, qada birrîna lekeya xwînê bi guncan dikare were zêde kirin.

3. Foregene Protease bi neheqî tê parastin, di encamê de çalakiya wê kêm dibe an neçalak dibe.

Pêşniyar: Şert û mercên hilanînê piştrast bikinya Foregene Protease an jî wê bi Foregene Protease nû ji bo reaksiyonên enzymatîk veguherîne.

4. Parastina nerast ya kîtê an dema hilanînê pir dirêj e, di encamê de hin pêkhateyên di kîtê de têk diçin.

Pêşniyar: Nû bikirinBuccal ADN-ê paqij kirincudakirin kit ji bo prosedurên têkildar.

5. Tampon WB etanolê mutleq lê zêde nake.

Pêşniyar: Piştrast bikin ku tampon WB hêjmara rast a etanolê mutleq zêde dike.

6. Eluent bi awayekî rast li fîlma silicone nayê zêdekirin.

Pêşniyar: 65 zêde bikin°CEluentê ku ji berê ve hatî germ kirin dadikeve nîvê parzûna silîkonê û 5 hûrdem li germahiya odeyê bihêle da ku kargêriya elûkirinê zêde bike.

LADN-ya genomîk-hilberîn îzole kirin

Sedemên gengaz ên jêrîn ev in:

1. Parastina nerast a nimûneyan an hilanînê ji bo pir dirêj dibe sedema hilweşîna DNA ya genomîk.

Pêşniyar: Çûçikên devkî bi tercîhî numûneyên nû têne kirin, û şûşeyên parastî divê ji bo derxistina DNA-ya genomîkî neyên bikar anîn.

2. Ger mîqdara nimûneya tevnê pir hindik be, dê naveroka DNA ya genomîkî ya hatî derxistin kêmtir be.

Pêşniyar: Talîmatên nimûneya şûşeya devkî ya di rêbernameya xebitandinê de bişopînin, bi qasî ku gengaz be paqij bikin da ku ji bo derxistina DNA-ya genomîk bi qasî şaneyan bi sûpa devkî ve were girêdan.

3. Foregene Protease bi neheqî tê parastin, di encamê de çalakiya wê kêm dibe an neçalak dibe.

Pêşniyar: Şert û mercên hilanînê piştrast bikinthe Foregene Protease an wê bi nû ve biguherînin Foregene Protease ji bo reaksiyona enzîmatîk.

4. Pirsgirêkên eluent.

Pêşniyar: Ji bo elutionê Buffer EB bikar bînin;heke ddH bikar bînin₂O an eluentên din, piştrast bikin ku pH ya eluate di navbera 7.0-8.5 de ye.

5. Eluate bi dilopek rast nayê zêdekirin.

Pêşniyar: Dilopên eluentê li nîvê parzûna silîkonê zêde bikin û 5 hûrdeman li germahiya odeyê bihêlin da ku kargêriya elûkirinê zêde bikin.

6. Şîva helandinê pir hindik kom dibe.

Pêşniyar: Bi kêmanî, ji bo derxistina DNA-ya genomîk wekî ku di rêwerzan de tê xwestin eluent bikar bîninne kêmtir ji 15μl.

Low paqijî of ADNya genomîkîzole kirin

Paqijiya DNA ya genomîkî ya kêm dikare bibe sedema têkçûn an encamên nerazî yên ceribandinên jêrîn, wek: enzîm nayên vekirin, PCR nikare perçeya genê ya balkêş bigire, hwd.

Sedemên gengaz wiha ne:

1. Qirêjiya heteroproteîn, qirêjiya ARN.

Analîz: Stûna paqijkirinê bi karanîna Buffer PW nehat şûştin;stûna paqijkirina şuştina Buffer PW bi karanîna leza navendî ya rast nehat şûştin.

Pêşniyar: Berî ku etanolê lê zêde bikin, pê ewle bin ku di rûbera zêde de baran nebe;Bawer bikin ku stûna paqijkirinê li gorî rêwerzan bişon, û ev gav nayê avêtin.

2. qirêjiya îyonê nepaqijî.

Analîz: Stûna paqijkirina şuştina WB ya tampon tenê carekê hate şûştin an jî hate şuştin, û di encamê de gemariya îyonî ya mayî derket.

Pêşniyar: Bawer bikin ku Buffer WB 2 caran li gorî rêwerzan bişon da ku îyonên bermayî bi qasî ku pêkan were rakirin.

3. Kêmbûna enzîma RNA.

Analîz: RNên biyanî li tamponê hatin zêdekirin;Operasyona şuştina PW ya tampon xelet bû, di encamê de bermahiyên RNase, bandor li operasyonên ceribandina RNA-ya jêrîn, wek transkrîpsiyona in vitro kir.

Pêşniyar: Asîda nukleîk a rêza Foregeneisolakîtên tion dikarin RNA bêyî zêdekirina RNase jêbirin,ji ber vê yekê Swab buccal / Kit îzolekirina DNA Card FTAhewce ne't RNase zêde bike;Jê bawer bin ku rêwerzên stûna paqijkirina şuştina Buffer PW bişopînin, û ev gav nayê avêtin.

4. Bermayiya Etanol.

Analîz: Tampon WB piştî şûştina stûna paqijkirinê santrîfujasyona lûleya vala pêk neanî.

Pêşniyar: Li gorî rêwerzan operasyona santrîfujasyona lûleya vala ya rast bikin.

5. Din qirêjiya nepakî.

Analîz: Nimûneyên hilanîn an nimûneyên taybetî pêşî nayên derman kirin.

Pêşniyar: Mînakê li gorî ku hatî destnîşan kirin bi tevahî pêşde bikin.