Taybetmendiya berbiçav a reaksiyona PCR-ê kapasîteya wê ya mezinbûnê û hesasiyeta pir zêde ye.Ji bo ku em performansa PCR û karbidestiya tespîtê baştir bikin, em pêbawer in ku kapasîteya zêdekirina PCR û hesasiya tespîtê baştir bikin, lê serêş di pêvajoya ceribandinê de ye.Pir caran pozîtîfên derewîn çêdibin, û mîqdarek pir hindik a nimûneya xaçeperçêkirinê an gemariya hilberê PCR dikare di ceribandinê de bibe sedema erênîyên derewîn.
Pênc cureyên qirêjiya hilberê PCR
Gelek sedem ji bo vegirtina PCR-ê hene, ku bi gelemperî di kategoriyên jêrîn de têne dabeş kirin:
Tevliheviya nimûneyê bi giranî ji ber qirêjbûna konteynerê ya ji bo berhevkirina nimûneyê çêdibe, an jî dema ku nimûne tê danîn, ew ji konteynirê derdikeve ji ber zeliqandina nezelal, an jî nimûne bi derveyî konteynerê ve tê girêdan, ku ev yek dibe sedema gemarîbûnê;Di navbera nimûneyan de qirêjbûn dibe sedema qirêjbûnê;hin nimûneyên mîkrobîan, nemaze vîrus, dikarin bi aerosolan belav bibin an jî aerosolan çêkin, û di encamê de hevdu gemarî bibin.
Sedema bingehîn ev e ku di dema amadekirina reagentên PCR de, çeka nimûneyê, konteynir, ava dudistilt û çareseriyên din ji hêla şablona asîda nukleî ya PCR ve têne qirêj kirin.
Di laboratûwarên biyolojiya molekular û hin laboratîfên ku plasmîdên klonkirî wekî kontrolên erênî bikar tînin, pirsgirêka gemariya plasmîdên klonkirî jî hevpar e.Ji ber ku naveroka klonkirina plasmîdê di qebareya yekîneyê de pir zêde ye, û di pêvajoya paqijkirinê de bêtir amûr û reagent hewce ne, û plasmîd di şaneyên zindî de ji ber mezinbûn û şiyana nûveberdana şaneyên zindî pir muhtemel e ku tevlihev bibe.
Di reaksiyonên PCR de pîsbûna hilberên zêdekirî pirsgirêka gemarê ya herî gelemperî ye.Ji ber ku mêjera kopî ya hilbera PCR mezin e (bi gelemperî 1013 kopî / ml), ku ji sînorê hejmara kopiya tespîtkirina PCR-ê pir zêde ye, rêjeyek pir hindik a qirêjiya hilberê PCR dikare bibe sedema erênîyên derewîn.
Qirêjiya aerosolê forma herî muhtemel a qirêjiya hilberên PCR-ê ye, û di heman demê de ya herî hêsan e ku meriv ji bîr neke.Ew di navbera rûbera şilek û hewayê de çêdibe.Bi gelemperî, dema ku qapax tê vekirin, dema ku nimûne tê aspirkirin, an jî dema ku lûleya reaksiyonê bi tundî tê hejandin jî, qirêjiya aerosolê dikare çêbibe.Li gorî hesaban, parçikek aerosolê dikare 48,000 kopî hebin, ji ber vê yekê qirêjiya ku ji ber vê yekê çêdibe pirsgirêkek e ku bala taybetî digire.
Bi taybetî, laboratûarên ceribandinê bi gelemperî heman cotek primers bikar tînin da ku genek diyar bikin.Bi demê re, rêjeyek mezin a qirêjiya hilbera PCR dê di cîhê laboratîfê de çêbibe.Dema ku qirêjiyek weha çêbibe, di demek kurt de ji holê rakirina wê dijwar e.
Ji bo sê celebên yekem ên qirêjiyê, em dikarin rêgezên bi bandor bikar bînin ku ji xwe dûr bixin, lê pêşîlêgirtina qirêjiya ku ji hêla hilberên PCR ve hatî çêkirin dijwar e, nemaze di avakirina laboratîfên PCR-ê yên ne-standard de.Di pêvajoya PCR de, dema ku tîpa pipetê şilê dimije û difûre, û qapaxa lûleya PCR vebe, dê aerosolek çêbibe.Molekulên ADNyê yên ku ji hêla aerosolê ve têne hilgirtin (yek aerosol dikare bi deh hezaran DNA hilgire) ji holê rakirina wan dijwar e ji ber ku ew di hewayê de diherikin.Dema ku dora paşîn a ceribandinên PCR-ê were destnîşan kirin, bêguman dê erênîyên derewîn çêbibin.
Wekî ku di jimareya jêrîn de tê xuyang kirin, kontrola neyînî di heman demê de bendera berjewendiyê ya têkildar jî zêde kir:
Beşa yekem a vê mijarê ya qirêjbûn û pêşîlêgirtina PCR li vir tê destnîşan kirin.Jimara paşîn dê beşa duyemîn "Pêşîlêgirtina qirêjiya hilberê PCR" ji we re bîne, ji ber vê yekê li bendê bin!
Dema şandinê: 25-2017-ê
