1: Di wextê de pêdiviyên ceribandinê biguherînin

Kontrola neyînî (NTC) saz bikin û wê gelek caran dubare bikin.Gava ku tê dîtin ku di laboratûarê de gemariya hilberê PCR heye, hemî pêdiviyên ceribandinê di wextê de biguhezînin.Mîna: ji nû ve rijandin û amadekirina primers, ji nû ve sterilîzekirina tîpa pipetê, lûleya EP, ddH2O, hwd., bi pîpetek nû veguhezînin, û bi demkî laboratîfên din deyn bikin da ku ceribandinên PCR bikin.Divê laboratûara pîskirî were hewakirin û bi tîrêjên ultraviyole were tîrêj kirin heya ku gemariya hilberê PCR ji holê rabe berî ku ezmûn bidome.

2: Dema rabûna UV dirêj bikin

Hêjayî gotinê ye ku ji bo rakirina gemariya DNA, divê tîrêjên ultraviyole bi rêkûpêk 2 demjimêran ji gelemperî were dirêj kirin.Tewra jî, bandora tîrêjên UV li ser rakirina perçeyên piçûk (li jêr 200 bp) gemariya DNA hîn jî ne baş e.

Dirêjahiya pêla Ultraviolet (nm) bi gelemperî 254/300nm e, û têra tîrêjkirina 30 hûrdeman e.Pêdivî ye ku were zanîn ku dema hilbijartina UV-ê ji bo rakirina qirêjiya hilberên mayî yên PCR-ê, divê dirêjahiya hilbera PCR û belavkirina bingehan di rêza hilberê de were hesibandin.Radyasyona UV tenê ji bo perçeyên dirêj ên jor 500 bp bi bandor e, û bandorek piçûk li ser perçeyên kurt dike.

Di dema tîrêjkirina UV de, bazên pyrimidine di hilberê PCR de dê dimeran çêbikin.Van dimer dikarin dirêjkirinê biqedînin, lê ne hemî pyrimidines di zincîra DNA de dikarin dimeran çêbikin, û tîrêjên UV jî dikarin dimeran bişkînin..Asta damezrandina dimer bi dirêjahiya pêla UV, celebê dimera pyrimidine û rêza nukleotîdên li tenişta cîhê dimer ve girêdayî ye.Ji ber vê yekê, heke perçeyên zêdekirî yên PCR piçûk in, tê pêşniyar kirin ku pergala qirêjiya hilberê UNG antî-PCR bikar bînin.

3: Bi gelemperî paqijkerên qirêjiya DNA têne bikar anîn

Gava ku pipet têne zêdekirin, aerosol bi hêsanî têne hilberandin, ku nehiştina wê dijwar e, û ew ê zû rûne.Ji ber vê yekê, bê guman hilbijarkek baş e ku meriv pir caran ji bo pêşîlêgirtina belavbûna qirêjiya DNA-yê paqijkerên taybetî yên qirêjiya DNA bikar bîne.

4: Pergala dijî qirêjiya UNG bikar bînin

Piştî ku qirêjiya hilberê PCR were rakirin, laboratûara ceribandinê dikare pergala qirêjiya hilberê UNG antî-PCR bikar bîne da ku pêşî li qirêjiya hilberê PCR bigire.Di laboratîfên gelemperî de, hûn dikarin dabeşên ceribandinê yên hêsan pêk bînin, bi hişkî qada hilberê PCR ji deverên din veqetînin, hin rêzik û rêzikên laboratîfê saz bikin, û perwerdehiya têkildar bimeşînin da ku pêşî li rûdana qirêjiya hilberê PCR bigirin.

Pêşniyar: Damezrandina laboratûvarek PCR-ya maqûl, domandina jîngehek PCR-ya baş, formulekirina prosedurên xebitandina PCR-ya standard, û çandina hişmendiya xebata hişk a ceribandinan mifteyên pêşîlêgirtin an kêmkirina qirêjiya ceribandinên PCR-ê ne.