Ji bo standardîzekirina behreya personelên ceribandinê SOP-ya ezmûna PCR saz bikin.
Ezmûnkar bi tundî rêgezên xebitandinê dişoxilîne, û qirêjiya PCR ya ku dibe ku ji hêla faktorên mirovî ve çêbibe kêm bike an pêşî li rûdana qirêjiyê bigire.Digel vê yekê, ceribandinvan divê xwedan zanîn û jêhatîbûna pîşeyî ya têkildar be, di nav de jêhatîbûna di xebitandina alavên têkildar, zelalkirina tevahiya pêvajoya xebatê, serdestkirina rêbazên dermankirinê yên gemarî û rêbazên kontrolkirina kalîteya laboratîfê, û karibe bi rast encamên testê şîrove bike.
Laboratûrek PCR ya standard ava bikin.
Laboratoriya PCR di prensîbê de li çar deveran tê dabeş kirin, ango qada amadekirina reagentê, qada pêvajoyê ya nimûneyê, qada amplification, û qada analîzkirina hilberê amplification.Du qadên yekem qadên pêş-zêdebûnê ne, û her du deverên paşîn deverên paş-zêdebûnê ne.Divê qada pêş-zêdebûnê û qada piştî-zêdekirinê bi hişkî ji hev were veqetandin.Materyalên ceribandî, reagent, kaxizên tomarkirinê, pênûs, materyalên paqijkirinê, hwd., Tenê dikarin ji devera pêş-zêdekirinê berbi qada piştî-zêdebûnê ve biherikin, ango ji devera amadekirina reagentê → qada pêvajoyê ya nimûneyê → qada amplîfasyonê → qada analîza hilbera zêdekirinê, û divê paşve neherike.Herikîna hewayê ya di laboratuarê de jî divê ji devera pêş-zêdebûnê berbi qada piştî-zêdebûnê ve biherike, û bi paş ve neherike.Sêwirana laboratîfê ya îdeal a PCR li jêr tê nîşandan:
Figure A: Moda sazkirina laboratûara PCR ya îdeal bi zexta neyînî li odeya tamponê
Figure B: Moda sazkirina laboratûara PCR ya îdeal bi zexta erênî li odeya tamponê
Diyagramên sazkirina laboratûwara PCR-ê yên ku di Figure A û Figure B de têne dayîn divê moda sazkirinê ya îdealtir be, û laboratûara bi şert û merc dikare ji bo sêwiranê veguhezîne vê modê.Ji bo laboratûwarên asayî, tê pêşniyar kirin ku qada zêdekirina PCR û qada analîza hilberê ji hev veqetin, û vekirina qapaxê bi qasî ku gengaz be li qada amadekirina nimûneyê û qada zêdekirina PCR-ê were kêm kirin.Bînin bîra xwe: Hilber û pêdiviyên ceribandinê yên li qada analîza hilberê bi tundî qedexe ne ku werin qada amadekirina nimûneyê û qada zêdekirina PCR.
Ger laboratuar tenê tespîtkirin û nasîna PCR-ê dike, tê pêşniyar kirin ku li şûna PCR-ya kevneşopî PCR-ya mîqdar a fluorescent bikar bînin.
Encamên tespîtkirina PCR-ya mîqdar a fluorescence dikare ji hêla sînyalên floransê ve were berhev kirin û analîz kirin, ji ber vê yekê ne hewce ye ku piştî reaksiyonê qapaxek ji bo elektroforezê vekin, ku ji qirêjiya hilbera PCR-ê ya ku ji ber rijandina hilberên reaksiyonê ji bo avakirina aerosolan pêk tê, dûr dixe.Ger hûn di dema qonaxa barkirina elektroforeziya gel de hejmara vebûnên kapê zêde bikin, îhtîmal e ku tevliheviya aerosolê çêbibe.Tête pêşniyar kirin ku sepana PCR-ya mîqdar pêşve bibin û hêdî hêdî PCR-ya kalîteyî biguhezînin.
Pergala qirêjiya hilberê UNG antî-PCR ji bo reaksiyona PCR tê bikar anîn.
Pergal li şûna dTTP dUTP bikar tîne.Piştî reaksiyona PCR, hemî hilberên PCR (parçeyên DNA) bi dUTP ve têne girêdan;di gera paşîn a reaksiyona PCR de, enzîma UNG ya ku li pergalê hatî zêdekirin li 37°C 5 hûrdem berî PCR tê înkubakirin, ku dikare bi taybetî hemî perçeyên DNA yên ku dUTP hene hilweşîne, û dûv re reaksiyona PCR pêk bîne.Ev dikare tevliheviya aerosolê ya ku ji hêla hilberên PCR ve hatî çêkirin bi tevahî rabike.Bandor di wêneya jêrîn de tê nîşandan:
Nîşe: Ji bo rêza rasterast PCR, hûn dikarin hilberên rêzê yên pergala gemarî ya hilberê antî-PCR ya Foregene hilbijêrin.Pêşniyar bikin
Ji bo laboratîfên ku ceribandina genotyping-ê ya mezin pêk tînin, bi tundî tê pêşniyar kirin ku ji bo ceribandina reagentan ji bilî avakirina laboratûarên maqûl, pergala qirêjiya hilberê UNG antî-PCR bikar bînin.
Bîranîn: Bikaranîna vê pergalê nikare qirêjiya hilberê PCR-ê ya ku ji berê ve hatî çêkirin jêbirin.Ji ber vê yekê, divê pergala UNG di destpêka ceribandina têkildar de were bikar anîn, û pergala UNG divê ji bo zêdekirina PCR were bikar anîn, da ku pêşî li gemariya hilberên PCR-yê bi xeletî erênî bigire.
Tête pêşniyar kirin ku hûn pergala Direct PCR-UNG ya Foregene bikar bînin dema ku ceribandinên mezin têne kirin, wek:
Plant Leaf Direct PCR Kit-UNG;
Plant Seed Direct PCR Kit-UNG;
Animal Tissue Direct PCR Kit-UNG;
Mouse Tail Direct PCR Kit-UNG;
Zebra Fish Direct PCR Kit-UNG.
Ev rêze kîtên ji Foregenene tenê dikare tespîtkirina PCR bi lez û bezek mezin pêk bîne, lê di heman demê de bi bandor pêşîlêgirtin û kontrolkirina qirêjiya hilberê PCR jî dike.
Dema şandinê: Mar-19-2021
