Kêmasiya bihîstinê (HL) di mirovan de nexweşiya seqetiya hestiyar a herî gelemperî ye.Li welatên pêşkeftî, ji sedî 80 ji bûyerên kerrbûna pêşziman di zarokan de ji ber faktorên genetîkî têne çêkirin.Ya herî gelemperî kêmasiyên yek-genê ne (wek ku di jimar 1 de tê xuyang kirin), 124 mutasyonên genê hatine dîtin ku bi windabûna bihîstinê ya ne-sendromî di mirovan de têkildar in, yên mayî ji hêla faktorên hawîrdorê ve têne çêkirin.Implantek koklear (alavek elektronîkî ya ku di guhê hundur de tête danîn ku rasterast stimulasyona elektrîkê ji nerva bihîstinê re peyda dike) ji bo dermankirina HL-ya giran vebijarka herî bibandor e, di heman demê de amûrek bihîstinê (alava elektronîkî ya derveyî ku pêlên deng vediguherîne û zêde dike) dikare alîkariya Nexweşên bi HL-ya nerm bike.Lêbelê, heya niha dermanên ku ji bo dermankirina HL-ya îrsî (GHL) peyda nakin.Di salên dawî de, tedawiya genê wekî nêzîkatiyek sozdar ji bo dermankirina bêserûberiya guhê hundur bala zêde kişandiye.

Fig1.Belavbûna cureyê guhastinê ya girêdayî kerrbûnê.[1]

Di van demên dawî de, zanyarên Enstîtuya Salk û Zanîngeha Sheffield encamek lêkolînê li Terapiya Molekuler - Rêbaz & Pêşkeftina Klînîkî [2] weşandin, ku perspektîfên serîlêdana berfireh ji bo tedawiya genê di vivo ya kerrbûna îrsî de nîşan da.Uri Manor, alîkarê profesorê lêkolînê li Enstîtuya Salk û rêvebirê Navenda Waitt ji bo Biyofotonîkên Pêşkeftî, got ku ew bi windabûna giran a bihîstinê ji dayik bû û hîs kir ku vegerandina bihîstinê dê diyariyek ecêb be.Lêkolîna wî ya berê dît ku Eps8 proteînek birêkûpêk a aktînê ye ku bi çalakiyên girêdan û vegirtinê ve aktîn e;di şaneyên porê koklear de, kompleksa proteîn a ku ji hêla Eps8 ve bi MYO15A, WHIRLIN, GPSM2 û GNAI3 ve hatî çêkirin, bi giranî herî zêde heye. Serişteyên stereocilia dirêj, ku bi MYO15A re, BAIAP2L2 li ser tîpên stereocilia kurttir herêmî dikin, ji bo domandina pêlên por hewce ne.Ji ber vê yekê, Eps8 dikare dirêjahiya stereocilia hucreyên porê, ku ji bo fonksiyona bihîstinê ya normal pêdivî ye, rêve bike;Jêbirin an mutasyon Eps8 dê bibe sedema stereocilia kurt, ku wê nikaribe bi rêkûpêk deng veguhezîne nîşanên elektrîkê ji bo têgihîştina mêjî, ku di encamê de dibe sedema kerrbûnê..Di heman demê de, hevkar Walter Marcotti, profesorek li Zanîngeha Sheffield, dît ku hucreyên porê di nebûna Eps8 de bi gelemperî nekarin pêşve bibin.Di vê lêkolînê de, Manor û Marcotti li hev kirin ku lêkolîn bikin ka zêdekirina Eps8 li hucreyên stereociliary dikare fonksiyona wan vegerîne û, di encamê de, bihîstinê di mişkan de baştir bike.Tîma lêkolînê vektora adeno-hevgirêdana virusê (AAV) Anc80L65 bikar anî da ku rêzika kodkirinê ya ku EPS8-a çolê vedihewîne bi derzîlêdana parzûna pencereya dor li koka mişkên Eps8-/- P1-P2 yên nûbûyî bi kar anî;di şaneyên porê koklear ên mişkî de Fonksiyona stereocilia beriya ku mezin bibin hate sererast kirin;û bandora tamîrkirinê ji hêla teknolojiya wênekêşiyê û pîvana stereocilia ve hate destnîşan kirin.Encaman destnîşan kir ku Eps8 dirêjahiya stereocilia zêde kir û fonksiyona hucreya porê di hucreyên frekansa kêm de sererast kir.Wan her weha dît ku, bi demê re, xuya bû ku hucre kapasîteya xwe ya xilaskirina bi vê terapiya genê winda dikin.Wate ev e ku dibe ku ev dermankirin hewce bike ku di nav zikmakî de were rêvebirin, ji ber ku şaneyên porê Eps8-/- dibe ku piştî çêbûna mişkan ji tamîrkirinê wêdetir zerarek mezin bûne an berhev kirine."Eps8 proteînek bi gelek fonksiyonên cihêreng e, û hîn jî gelek tişt hene ku lêkolîn bikin," Manor got.Lêkolîna pêşerojê dê vekolîna bandora terapiya genê Eps8 di vegerandina bihîstinê de di qonaxên cûda yên pêşkeftinê de, û gelo gengaz e ku meriv derfetên dermankirinê dirêj bike.Tesaduf, di Mijdara 2020-an de, Profesor KarenB Avraham ji Zanîngeha Tel Aviv li Israelsraîl encamên xwe di kovara EMBO Molecular Medicine [3] de weşand, ku teknolojiyek nûjen a terapiya genê bikar tîne da ku vîrusek adeno-girêdayî sentetîk a bê zirar AAV9-PHP biafirîne.B, Kêmasiya genê ya di şaneyên porê yên Syne4-/- mişkan de bi derzîlêdana vîrusek ku rêzika kodkirina Syne4 hildigire nav guhê hundurê mişkan, hate tamîrkirin, hişt ku ew bikeve nav şaneyên por û materyalê genetîkî yê hilgirtî azad bike, û rê bide wan ku mezin bibin û bi rengek normal tevbigerin (wek Fig. 2).

Fig2.Nûneriya şematîkî ya anatomiya guhê hundur, bi baldarî li ser organana Corti û fonksiyona hucreyî ya nesprin-4.

Tê dîtin ku karanîna gene terapiya ji bo bidestxistina armanca dermankirina nexweşiyên mîrasî di asta genê de bi danîn, rakirin an rastkirina genên mutated ji bo dermankirinê (ango kontrolkirina guheztinên genetîkî yên di nexweşiyê de) xwedî bandorek klînîkî ya bilind e.perspektîvên serîlêdanê.Rêbazên terapiya genê ya heyî ji bo kerrbûna kêmbûna genetîkî dikare li kategoriyên jêrîn were dabeş kirin:

şûna genê

Veguheztina genê bê guman forma herî "serast" ya terapiya genê ye, ku li ser bingehê nasandin û cîhgirtina genek xelet bi kopiyek normal an çolê ya genê ye.Yekem lêkolîna serketî ya tedawiya genê guhê hundurîn ji bo windabûna bihîstinê ya ku ji ber jêbirina gena veguhezkarê glutamate ya vezîkuler 3 (VGLUT3);Radestkirina bi navbeynkariya AAV1 ya zêdederbirrîna VGLUT3 ya exogenous di hucreyên porê guhê hundurîn (IHCs) de dikare bibe sedema vegerandina bihîstinê ya domdar, başkirina morfolojiya synaptîk a qismî, û bersivên konvulsîv [4].Lêbelê, di nimûneyên ku di nav wan de du veguheztinên genê yên ku ji AAV-ê hatine radest kirin ku di pêşgotina li jor de hatine destnîşan kirin de, girîng e ku were zanîn ku modelên mişkî yên ku ji bo hin celeb jêbirina genê nexweşiyên windabûna bihîstinê yên mîrasî têne bikar anîn bi demkî ji mirovan cûda ne, û di mişkên P1 de, guhê hundur di qonaxa gihîştî ya pêşkeftinê de ye.Berevajî vê yekê, mirov bi guhê hundurê gihîştî têne dinyayê.Ev cûdahî rê li ber sepana muhtemel a encamên mişkê ji bo dermankirina nexweşiyên kerrbûna îrsî ya mirovan digire heya ku terapiya genê ji guhên mişkê gihîştî re neyê şandin.

Guherandina Genê: CRISPR / Cas9

Li gorî "veguheztina genê", pêşkeftina teknolojiya sererastkirina genê destpêka dermankirina nexweşiyên genetîkî ji kokê ve aniye.Ya girîng, rêbaza guheztina genê kêmasiyên rêbazên terapiya genê ya kevneşopî ya zêde-îfadekirinê ku ji bo nexweşiyên kerrbûna mîrasî yên serdest ne guncaw in, û pirsgirêka ku rêbaza zêdederbirînê dirêj nake, vedigire.Piştî ku lêkolînerên Çînî bi taybetî alelê mutant Myo6C442Y di mêşên Myo6WT/C442Y de bi karanîna pergala guherandina genê AAV-SaCas9-KKH-Myo6-g2 xistin û di nav 5 mehan de ji têkbirinê, mêş Fonksiyona bihîstinê ya modelê hate vegerandin;di heman demê de, di heman demê de hate dîtin ku rêjeya zindîbûna şaneyên porê di guhê hundur de baştir bûye, şeklê cilia bi rêkûpêk bûye, û nîşanên elektrofîzyolojîkî hatine rast kirin [5].Ev yekem lêkolîn e li cîhanê ku teknolojiya CRISPR/Cas9 bikar tîne ji bo dermankirina kerrbûna îrsî ya ku ji ber mutasyona gena Myo6 pêk tê, û ew pêşkeftinek lêkolînê ya girîng a teknolojiya sererastkirina genê ye ji bo dermankirina kerrbûna îrsî.Wergera klînîkî ya dermankirinê bingehek zanistî ya zexm peyda dike.

Rêbazên radestkirina terapiya genê

Ji bo ku tedawiya genê serketî be, molekulên DNA yên tazî ji ber hîdrofîlîbûn û barkirina neyînî ya komên fosfatê nikaribin bi bandor derbasî hucreyan bibin û ji bo yekparebûna molekulên asîdên nukleî yên lêzêdekirî were misoger kirin, divê rêbazek ewledar û bi bandor were hilbijartin.ADN-ya pêvekirî digihîje şaneyek an tevna armanc.AAV ji ber bandora wê ya enfeksiyonê ya bilind, immunogenicity kêm, û tropîzma berfireh a ji cûreyên cûda yên tevnvîsê re bi berfirehî wekî wesayîtek radestkirinê ji bo dermankirina nexweşiyê tê bikar anîn.Heya nuha, xebatek mezin a lêkolînê tropîzma binecureyên cihêreng ên AAV-ê bi celebên hucreyên cihêreng ên di koka mişkê de diyar kiriye.Bikaranîna taybetmendiyên radestkirina AAV-ê ku bi pêşekên hucre-taybetî re têne hev kirin dikare bigihîje îfadeya taybetî ya hucreyê, ku dikare bandorên derveyî-armanc kêm bike.Wekî din, wekî alternatîfek vektorên kevneşopî yên AAV-ê, vektorên nû yên sentetîk ên AAV bi domdarî têne pêşve xistin û di guhê hundur de kapasîteya veguheztinê ya jorîn nîşan didin, ku ji wan AAV2 / Anc80L65 ya herî berfireh tê bikar anîn.Rêbazên radestkirina ne-vîrûs dikare li ser rêbazên fîzîkî (microinjection û elektroporation) û rêbazên kîmyewî (lipîd-based, polymer-based, û nanoparticles zêr) bêne dabeş kirin.Her du nêzîkatî di dermankirina nexweşiyên kerrbûna îrsî de hatine bikar anîn û avantaj û kêmasiyên cihêreng nîşan dane.Digel wesayîta radestkirinê ya ji bo terapiya genê wekî wesîle, nêzîkatiyên cihêreng ên ji bo rêveberiya genê di vivo de dikarin li ser bingeha celebên hucreyên armanc, rêyên rêveberiyê, û bandoriya dermankirinê werin bikar anîn.Struktura tevlihev a guhê hundur gihandina şaneyên armancê dijwar dike û belavkirina ajanên sererastkirina genomê hêdî ye.Labîrenta parzûnan di nav labîrenta hestî ya hestiyê demî de cih digire û di nav xwe de kanala koklear, kanala nîvcirkuler, utricle û balonê dihewîne.Veqetandina wê ya têkildar, gera lîmfatîk a hindiktirîn, û veqetandina ji xwînê ji hêla astengiyek mazî ya xwînê ve gihandina pergalî ya bandorker a dermanan tenê ji mişkên neonatal re sînordar dike.Ji bo bidestxistina titerên vîrusê yên ku ji bo terapiya genê maqûl in, derziya rasterast a herêmî ya vektorên virusê di guhê hundur de hewce ye.Rêyên damezrandî yên derzîlêdanê ev in [6]: (1) membrana pencereya dor (RWM), (2) trakeostomî, (3) kokleostomiya endolymphatic an perilymphatic, (4) membrana pencereya dor û pêvekirina lûleyê (CF) (wek Fig. 3).

Fig3.Radestkirina guhê hundurê terapiya genê.

Tevî ku gelek pêşkeftin di tedawiya genê de hatine çêkirin, li ser bingeha armancên wergêra klînîkî, pêdivî ye ku bêtir kar were kirin berî ku terapiya gene bibe vebijarkek dermankirina rêza yekem ji bo nexweşên bi nexweşiyên genetîkî, nemaze di pêşxistina vektorên ewledar û bi bandor û rêbaza radestkirinê de.Lê em bawer dikin ku di demek nêzîk de, ev celeb dermankirin dê bibin bingehek dermankirina kesane û dê bandorek pir erênî li ser jiyana mirovên bi nexweşiyên genetîkî û malbatên wan bike.

Foregene di heman demê de ji bo genên armanckirî kîtekîtek verastkirina bilind-rêveberî da destpêkirin, ku bilez e û dikare reaksiyonên veguheztina berevajî û qPCR bêyî derxistina RNA bike.

Girêdanên hilberê

Kîta RT-qPCR ya rasterast ya hucreyê-Taqman/SYBR KESK I

Ji bo bêtir agahdariya hilberê, ji kerema xwe têkilî:

overseas@foregene.com