Di deh salên çûyî de, teknolojiya guherandina genê ya li ser bingeha CRISPR bi lez pêşketiye, û di ceribandinên klînîkî yên mirovî de ji bo dermankirina nexweşiyên genetîkî û penceşêrê bi serfirazî hate sepandin.Di heman demê de, zanyar li çaraliyê cîhanê bi domdarî amûrên nû yên bi potansiyela guherandina genê dişoxilînin da ku pirsgirêkên amûrên guherandina genê yên heyî û biryardar çareser bikin.

Di îlona 2021-an de, tîmê Zhang Feng di kovara Science [1] de kaxezek weşand, û dît ku cûrbecûr transposter enzîmên asîdên nukleîk ên rêberiya RNA-yê kod dikin û navê wê kirine pergala Omega (di nav de ISCB, ISRB, TNP8).Di lêkolînê de her weha hate dîtin ku pergala Omega beşek RNA bikar tîne da ku rêvekirina zincîra dualî ya DNA, ango ωRNA, bibire.Ya girîngtir, ev enzîmên asîda nukleîk pir piçûk in, tenê ji% 30-ê CAS9, ev tê vê wateyê ku dibe ku ew bêtir bigihîjin hucreyan.

Di 12-ê Cotmeha 2022-an de, tîmê Zhang Feng di kovara Nature de bi navê: Structure of Omega Nickase ISRB in Complex with ωrna and Target DNA [2] weşand.

Di lêkolînê de strukturên mîkroskopa elektronîkî yên cemidî yên ISRB-ωρNA û kompleksa DNA ya armanc di pergala Omega de bêtir analîz kirin.

ISCB bav û kalê CAS9 e, û ISRB heman tişta nebûna qada asîda nukleîk a HNH ya ISCB ye, ji ber vê yekê mezinahî piçûktir e, tenê bi qasî 350 asîdên amînî.DNA di heman demê de bingehek ji bo pêşveçûn û veguherîna endezyariyê peyda dike.

IsrB-ya rêberiya RNA endamek malbata OMEGA ye ku ji hêla supermalbata transposonan IS200/IS605 ve hatî kod kirin.Ji analîza fîlogenetîkî û qadên bêhempa yên hevpar, IsrB îhtîmal e ku bibe pêşengê IscB, ku bavê Cas9 e.

Di Gulana 2022-an de, Laboratory Lovely Dragon ya Zanîngeha Cornell kaxezek di kovara Science [3] de weşand, ku avahiya IscB-orRNA û mekanîzmaya jêkirina DNA-yê analîz dike.

Li gorî IscB û Cas9, IsrB ji qada nukleazê ya HNH, loba REC, û piraniya domên rêzikên PAM-ê yên ku tevdigerin tune ye, ji ber vê yekê IsrB ji Cas9 pir piçûktir e (tenê bi qasî 350 asîdên amînî).Lêbelê, mezinahiya piçûk a IsrB-ê ji hêla RNA-ya rêber a nisbeten mezin ve tê hevseng kirin (ARN-ya wê ya omega bi qasî 300 nt dirêj e).

Tîma Zhang Feng avahiya mîkroskopa kryo-elektronî ya IsrB (DtIsrB) ji bakteriya anaerobî ya şil-germê Desulfovirgula thermocuniculi û kompleksa wê ya ωRNA û DNA-ya armanc analîz kir.Analîza strukturî destnîşan kir ku avahiya giştî ya proteîna IsrB bi proteîna Cas9 re strukturek piştê parve kir.

Lê cûdahî ev e ku Cas9 loba REC-ê bikar tîne da ku nasîna armancê hêsantir bike, dema ku IsrB xwe dispêre ωRNA-ya xwe, ku beşek wê avahiyek sê-alî ya tevlihev pêk tîne ku mîna REC tevdigere.

Ji bo baştir fêmkirina guhertinên strukturî yên IsrB û Cas9 di dema pêşkeftina ji RuvC de, tîmê Zhang Feng strukturên DNA-girêdana armanc ên RuvC (TtRuvC), IsrB, CjCas9 û SpCas9 ji Thermus thermophilus dan ber hev.

Analîza strukturî ya IsrB û ωRNAya wê eşkere dike ka IsrB-ωρNa çawa bi hev re DNA-ya armancê nas dike û diqetîne, û di heman demê de bingehek ji bo pêşdebirin û endezyariya vê nukleazê piçûktir peyda dike.Berawirdkirin bi pergalên din ên bi rêberiya RNA re têkiliyên fonksiyonel ên di navbera proteîn û RNAyan de ronî dike, têgihîştina me ya biyolojî û pêşkeftina van pergalên cihêreng pêşde dike.

Girêdan:

1.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abj6856

2.https://www.science.org/doi/10.1126/science.abq7220

3.https://www.nature.com/articles/s41586-022-05324-6