Hûn çiqas dizanin

Derbarê Nderxistina asîda ucleic

Destpêk û dawiya asîda nukleîk a paqijkirî

Her tişt di destpêkê de dijwar e, asîda nukleîk a paqijkirî ya herî zêde ye

Destpêkirina ceribandinên molekular, ji bo ceribandinên paşê

Serkeftin an têkçûn xwedî bandorek girîng e.

Spektrofotometra UV-ya şopî / ultra-şop ji hêla gelek lêkolînerên zanistî ve tê pêşwaz kirin ji ber ku ew dikare hûrbûna asîdê nukleîk û bermahiyên îyonên proteîn û xwê bi hêsanî, zû û aborî tespît bike.

Wekî ku em hemî dizanin, A260 tê wateya nirxa OD vegirtina asîdên nukleîk, A280 tê wateya nirxa OD vegirtinê ya proteîn, A230 tê wateya nirxa OD ya vegirtina îyona xwê, ji ber vê yekê A260 dikare giraniya asîdê nukleîk veguherîne, A260/280 tê wateya bermayiya proteînê, A260/230 tê wateya ku bermahiyên îyona xwê tenê li gorî pîvanek mezin e.konvansiyonel” bawer bikin ku ew dikare paqijiya ADN û ARNyê rave bikeheta radeyekê.Ew ne standardek tenê ye ji bo naskirina hilber û paqijiya asîda nukleîk, ew tenê wekî referans tê bikar anîn, û ew ne "standardek zêr" e.

Destûra Thermo Fisher ND-2000 pêbaweriya encamên testê tekez dike

Sedem ev e ku encamên ku bi karanîna spektrofotometerek mîkro/ultramîkro UV-yê têne wergirtin tenê hilber û paqijiya asîda nukleîk ji alîkî ve nîşan didin, û gelek faktorên bandorker hene (rêya optîkî, hêjmara nimûneyê, giraniya nimûneyê, nirxa pH, îyonên din ên ku bandorê li pîvandina vegirtinê dikin, hwd.), nirxa OD ya hatî pîvandin ne hewce ye ku rast be.Di heman demê de, ji ber nebûna taybetmendiya maddeya destnîşankirina nirxa vegirtinê, ADN-ya yek-zindî, ADN-ya du-zindî, RNA, dNTPs, û hin proteînan hemî di dirêjahiya pêlê de 260nm lûtkeyên vegirtinê hene, û giraniya ku tenê ji hêla A260 ve hatî destnîşankirin ne hewce ye ku DNA an RNA ya rastîn e.Lihevhatin, û yekitî û kêmbûna wê nayê darizandin.

Ji ber vê yekê meriv çawa qalîteya asîda meya nukleîk a paqijkirî dadbar dike?Ji bilî karanîna spektrofotometerek mîkro / ultramicro UV ji bo tespîtê, rêbazên wekî elektroforez gêlê agarose jî hewce ne ku bi dîtbarî paqijî û yekitiya asîda nukleîk nîşan bidin, û heya radeyekê hûrbûnê nîşan bidin.Bi vî rengî, hilberîna asîda nukleîk û paqijiya ku ji encamên tespîtkirina rêbazên cihêreng hatî wergirtin pêbawer e.

Berhevdana nexşeya ezmûnî

DNA-ya genomîk a hucreyên H1299 bi karanîna kîtên derxistina DNA yên pargîdaniya A-yê hate derxistin, û qirêjiya nepakî ya girîng hate dîtin, ku di encamê de nirxên OD-ê bilind bû.

(Nirxa pîvana OD û elektropherograma têkildar)

Indeksa nirxandinê

Ma ji bo hilber û ceribandina kalîteyê "standardek zêr" heye?

Bi qasî ku em dizanin, rêbazek hêsan, bilez û erzan tune.Ka ew spektrofotometer, elektroforez gel, an spektrometriya girseyî be, ew hemî hûrbûn û paqijiya asîda nukleîk a di çareseriyê de ji aliyên cihêreng vedigirin, û pêdivî ye ku ew bi vegotina hevûdu ve werin darizandin.

Indeksa nirxandina çêtirîn her dem esepana ceribandinê ya şopandinê.Ew bandorê li ser kargêriya veguheztina berevajî û zêdekirina PCR nake.Bidestxistina hilberên zêdekirina pêbawer û nirxên Ct, û bidestxistina rêzek bêkêmasî bi rêzgirtinê derxistina asîda nukleîk a serketî ye.

Bi kurtasî, divê nêrîna teoriya rêje-tenê ji hêla dîtina "bikaranîna encamên ceribandinê yên baş ên jêrîn wekî pîvanên derxistina baş" were dijber kirin!

Kîtên derxistina DNA RNA ya Foregene têne pêşniyar kirin ku paqijiya DNA / RNA ya bilind bistînin:

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/