Makîneya PCR|Ma hûn bi rastî fêm dikin?

Teknolojiya PCR ya Xelata Nobelê wergirtiye

Di sala 1993 de, zanyarê Amerîkî Mulis Xelata Nobelê ya Kîmyayê wergirt, û serkeftina wî îcada teknolojiya PCR bû.Sêrbaziya teknolojiya PCR di van taybetmendiyan de ye: Ya yekem, mîqdara ADN ya ku were zêdekirin pir hindik e, û ji hêla teorîkî ve yek molekulek dikare ji bo zêdekirinê were bikar anîn;ya duwem, karîgeriya amplification bilind e, û mîqdara genê hedef bi berferehî ye.Amplification, di çend demjimêran de zêdetirî 10 mîlyon carî.Naha amûra PCR bi berfirehî di lêkolîna zanistiya jiyanê û gelek aliyên din de tê bikar anîn.

Dibe ku model û hilberînerên cihêreng ên gerîdeyên germî performans û dubarebûna cûda nîşan bidin.Van ciyawazî ne tenê bandorkeriya PCR lê di heman demê de li ser rastbûn û hevgirtina daneyên ku hatine wergirtin jî bandor dike.Fêmkirina taybetmendiyên makîneya PCR dikare ji me re bibe alîkar ku serfiraziya ceribandinên xwe zêde bikin.

Modula germkirinê

Rastiya germahiya çerxa termal dikare ji bo serkeftin an têkçûna PCR diyarker be.Ji bo bidestxistina encamên PCR-ya pêbawer û dubarekirî jî domdariya germahiya baş-baş li ser bloka germkirinê jî krîtîk e.

Yek rê ji bo misogerkirina rastbûna termal ev e ku meriv pir caran bi karanîna kîtên verastkirina germahiyê ceribandin û li gorî ku ji hêla pisporek perwerdekirî ve hewce ye ji nû ve pîvandin.Testên verastkirina germahiyê bi gelemperî têne bikar anîn:

Rastbûna baş-baş li gorî mîhenga germahiya di moda îsotermîk de

Rastbûna baş-baş-li gorî germahiya sazkirî piştî veguherîna germahiyê

Heat Lid Temperature Accuracy

Primer Annealing Temperature Control

Kontrolkirina germahiya gradîentê fonksiyonek amûra PCR-ê ye ku xweşbînkirina annealkirina primer di PCR de hêsantir dike.Armanca mîhenga gradientê ew e ku meriv di navbera modulan de germahiyên cihêreng bi dest bixe, û bi ≥2°C bilindbûn û daketina germahiyê ya di navbera her stûnê de, germahiyên cihêreng dikarin bi hevdemî werin ceribandin da ku germahiya herî baş a pîvazkirina primerê were bidestxistin.Ji hêla teorîkî ve, gradientek rastîn di navbera modulan de germahiya rêzê digihîje.

Lêbelê, gerîdokên germî yên kevneşopî bi gelemperî yek bloka germî bikar tînin û germahiyê bi navgîniya du hêmanên germkirin û sarkirinê yên ku li her du aliyan têne bicîh kirin, kontrol dikin, ku pir caran dibe sedema sînorên jêrîn:

Tenê du germahî dikarin bêne saz kirin: Germahiya bilind û nizm ji bo vejandina primerê li her du dawiya modula termal têne danîn, û mîhengkirina rastîn a germahiyên din di navbera modulê de nayê bidestxistin.

Ji ber danûstendina germê ya di navbera stûnên cihêreng de, germahiya di navbera deverên cihêreng ên li ser modulê de îhtîmal e ku li şûna pileyek xêzikek rastîn li pey kemberek sigmoidal be.

Germahiya nimûne

Ji bo rastbûna encamên PCR-ê şiyana çerxa termalê ya kontrolkirina germahiya nimûneyê pir girîng e.Parametreyên taybet ên amûrê yên wekî rêjeyên rampê, demên ragirtinê, û algorîtmayan ji bo pêşbînkirina germahiya nimûneyê krîtîk in.

Rêjeya germkirin û sarbûna makîneya PCR tê vê wateyê ku germahî di navbera gavên PCR de ku di heyamek diyarkirî de çêdibin diguhere.Ji ber ku ji bo veguheztina germê ji modulê ber bi nimûneyê ve demek diyar digire, rêjeya germkirin û sarbûna rastîn a nimûneyê dê hêdîtir be.Ji ber vê yekê, pênaseya leza guherîna germahiyê pêdivî ye ku were cûda kirin û fêm kirin.

Rêjeya rampê ya modulê ya herî zêde an lûtkeyê guherîna germahiya herî zû ya ku modul dikare di demek pir piçûk de di dema rampê de bi dest bixe destnîşan dike.

Rêjeya rampê ya blokê ya navîn rêjeya guherîna germahiyê di demek dirêjtir de destnîşan dike û dê pîvanek nûneriya leza makîneya PCR peyda bike.

Rêjeya germkirin û sarbûnê ya herî zêde ya nimûneyê û rêjeya germbûn û sarbûnê ya nimûneyê ya navîn germahiya rastîn a ku ji hêla nimûneyê ve hatî wergirtin nîşan dide.Rêjeya germkirin û sarbûna nimûneyê dê berhevokek rastîn a performansa makîneya PCR û bandora wê ya potansiyel li ser encamên PCR peyda bike.

Dema ku guheztinek cycler tê kirin, tê pêşniyar kirin ku amûrek bi bernameyek rêjeya rampê bikar bînin ku moda berê simule dike ji bo veguheztina hêsantir û bandora hindiktirîn li ser dubarebûna PCR.

Pêdivî ye ku çerxa termalê tenê piştî ku nimûne bigihîje germahiya diyarkirî bi gavan ve were sêwirandin.Bi vî rengî, dema ku nimûne di germahiya diyarkirî de tê domandin dê bi şert û mercên çerxa têkildar ên ku di prosedûra xebitandinê de hewce ne re rasttir were domandin.

Germahîker bi gelemperî algorîtmayên matematîkî yên tevlihev bikar tînin da ku pê ewle bibin ku nimûne dikarin zû bigihîjin germahiyek diyarkirî li gorî bernameyek pêşwext.Li ser bingeha qebareya pergala reaksiyonê û qalindahiya plastîkên PCR-ê yên ku têne bikar anîn, algorîtma dikare germahiya nimûneyê û dema ku ew ê bigihîje germahiya destnîşankirî pêşbîn bike.Bi van algorîtmayan ve girêdayî ye, di dema pêvajoya germkirin an sarbûna çerxa termalê de, germahiya blokê bi gelemperî ji nirxa diyarkirî derbas dibe bi pêvajoyek ku jê re tê gotin bloka germî zêdebûn an kêmbûn.Sazkirinek wusa piştrast dike ku nimûne bi lez û bez bigihîje germahiya destnîşankirî bêyî ku xwe zêde bike an jî kêm bike.

Rêbaza ezmûnî

Faktorên ku dikarin rêwerziya gerîdokek termal zêde bikin rêjeyên rampê, mîhengên bloka termal, û yekbûna platformên otomasyonê hene.

Rêjeya germkirin û sarbûna çerxa termal leza ku ew digihîje germahiya destnîşankirî destnîşan dike.Çiqas ku germahî zû bilind bibe û dakeve, ew ê PCR zûtir bixebite, ku tê vê wateyê ku di demek diyarkirî de bêtir ceribandin dikarin bêne qedandin.Wekî din, ceribandin dikarin bi karanîna DNA polîmerazên bileztir werin bilez kirin.

Sêwirana modula cyclerkera termal jî ji bo ceribandinên PCR girîng e.Mînakî, modulên veguhezbar di hejmara nimûneyan de di her gavê de nermbûnê dihêlin.Wekî din, modulên germkirinê yên bi modulên ferdî yên kontrolkirî ji bo meşandina bernameyên PCR-ê yên cihêreng bi hevdemî li ser yek çerxa termalê îdeal in.

Ji bo PCR-ya xweya bilind a otomatîk, nermalava ku pergala hilgirtina pipetkirinê kontrol dike divê bernamekirî û lihevhatî be.Pergalên otomatîkî ji bo pêkanîna reaksiyonên PCR-ya bilind-rêveberî îdeal in ji ber ku ew dikarin bi destwerdana hindik mirovî bi domdarî werin xebitandin, bi vî rengî dema ku ji bo sazkirina ceribandina destan hewce dike kêm bikin û hejmara reaksiyonên di demek diyarkirî de zêde bikin.

Pêbawerî, domdarî û pêbaweriya kalîteyê ya Cycles Termal

Digel kapasîteyên performans û berbikê, divê makîneya PCR jî bikaribe li hember hin karanîna dubare, stresa jîngehê, û şertên barkirinê bisekinin.Dibe ku hin çêker rapor bikin ka amûr çawa ceribandinên pêbawer û domdariyê dike.Tespîtkirina amûra PCR ya têkildar ev e:

Pêbawerî: Rêzên mekanîkî têne bikar anîn da ku ceribandinên dubare li ser hêmanên amûrê yên ku pir caran têne bikar anîn, wekî qapaxên germî, panelên kontrolê / ekranên destikê, û modulên bisiklêdana germahiyê têne bikar anîn.

Zexta hawîrdorê: Odeyên jîngehê dikarin werin bikar anîn da ku şert û mercên cûda yên ceribandinên rûtîn, wek germahî, şilbûn, simul bikin.

Testkirina barkirinê: Testkirina şok û vibrasyonê ya tund dikare li gorî standardên Komeleya Keştiya Ewlekariya Navneteweyî were kirin da ku pê ewle bibe ku amûr dikare di şert û mercên xebitandinê yên nezerar de bigihîje.

Garantî û karûbarê ji bo domandina makîneya PCR

Tevî ceribandina pêbawerî û domdariyê ya hişk, gerîdokên termal bê guman di jiyana amûrê de pirsgirêkên teknîkî hene.Ji bo aramiya hişê, dema kirîna amûrek divê garantî, karûbar û lênihêrîna çêker were hesibandin.

Zehmetiya karûbarên wekî lênihêrîna li cîh / veger-fabrîkayê, karûbarên çavdêriya dûr, û amûrên veguheztinê di pêvajoya lênihêrînê de, hwd., Ji bo kêmkirina bandorê li ser karbidestiya kar.

Dirêjahiya heyama garantiyê, dema zivirîna karûbarê, gihîştina piştgiriya teknîkî, û jêhatîbûna personelên piştevaniya profesyonel.

Pêkanîna sazkirinê, xebitandin, hevkarî û verastkirina amûrê ji bo bicîhanîna laboratuar û daxwazên rêziknameyê yên têkildar.Karûbarên lênêrînê yên wekî verastkirina germahiyê, ceribandin, û kalibrasyonê peyda dibin da ku pê ewle bibin ku amûr bi pîvanên têkildar re rast tevdigere.

Berhemên Têkildar: