Pêşkêş:
Molekulên ARNyê dikarin bi molekulên din ên biyolojîkî, wek proteîn, ADN û ARNyê re bi berfirehî têkilî deynin, û bi vî rengî di şaneyek û organîzmayan de di forma kompleksên makromolekulî de hene.Di nav wan de, kompleksên ARN-proteîn hebûn û fonksiyona ARNyê yek ji wan formên girîng in.RNA pull-down rêbazek klasîk e ji bo vekolîn û naskirina molekulên RNA, nemaze proteînên hevberdanê yên molekulên lncRNA, û ji hêla piraniya lêkolîner û kovarên akademîk ên navdar ên navneteweyî ve tê nas kirin.Îro FORREGENE dê prensîba ceribandinê û pêvajoya teknîkî ya vekişîna RNA bi we re parve bike, dibe ku hûn wê bikar bînin
1. Prensîba ceribandî ya teknolojiya daxistina RNA:
Veguheztin û senteza in vitro ya lncRNA an perçeyên lncRNA yên ku bi biotin nîşankirî ne (tevî perçeyên RNA yên ku wekî kontrolên erênî û neyînî têne bikar anîn), û bi ekstraktên şaneyê ve înkubat kirin;ji bo berhevkirina kompleksên RNA-proteîn an RNA-RNA pîçên magnetîkî yên avîdîn-ankor bikar bînin.Ger molekula hedefa proteînê ya ku bi lncRNA re têkiliyek dike were tesbît kirin, li ser hilbera ARN-ê elektroforeza proteînê pêk bînin, proteîna armancê bi rengkirina zîv vedîtin, û gêlê ji bo spektrometriya girseyî qut bikin;di heman demê de rasterast verastkirina blota rojavayî li ser hilbera dakêşanê jî pêk tîne;heke were tespît kirin Ji bo molekulên hedef ên RNA yên ku bi lncRNA re têkilî dikin, hilberên RNA-kişandina xwarê dikevin ber derxistina RNA û tespîtkirina qRT-PCR ya taybetî tê kirin.
2. RNA pêvajoya ceribandina teknolojiyê dakêşe:
3. Karûbarê teknîkî ya ji bo hilweşandina RNA ya FOREGENE:
Çanda şaneyê
Amadekirina ekstrakta proteîna giştî ya şaneyê/nukleer/plazma
ARN ceribandina hilweşandinê
Elektroforeza SDS-PAGE, pişka zîv
Tecrûbeyên Mass spectrometry û WB
rapora Experimental
4. Doza ezmûnî
Nîgara jêrîn encamên dakêşana RNA ya FJ Bio-Bio û vedîtina elektroforezê ya SDS-PAGE nîşan dide, ku tê de tîra sor band cûda nîşan dide:
Koma lêkolînê ya Profesor Song Xu ya Zanîngeha Sichuan di warê lêkolîna lncRNA de 15 sal kombûna demdirêj berhev kiriye.Koma lêkolînê ya Foregene Bio û Profesor Song Xu hevkarî kirin da ku teknolojiya dakêşana RNA ya lncRNA bidin destpêkirin, ku dê ji bo ceribandina we encamek têrker bide we.
Dema şandinê: Jun-11-2021