Vakslêdana mRNA çi ye
Vakslêdana mRNA RNAyê vediguhêze şaneyên laş da ku antîjenên proteîn eşkere bike û hilberîne piştî guheztinên têkildar di vitro de, bi vî rengî laş rê dide ku bertekek berevaniyê li dijî antîjenê çêbike, bi vî rengî kapasîteya berevaniya laş berfireh dike.[1,3].
Wêne 1: Diyagrama şematîkî ya bandora derzîlêdana rasterast a derziya mRNA [2]
Dabeşkirina derziyên mRNA
Vakslêdanên mRNA li du celeb têne dabeş kirin:nereplicatingmRNA ûxwe zêdekirinmRNA: mRNA-ya xwe-pêkvekirî ne tenê antîjena mebestê kod dike, lê di heman demê de replikasyonê jî kod dike ku zêdekirina RNA-ya hundurîn û mekanîzmaya vegotina proteîn dike.Vakslêdanên mRNA yên ku nayên dubarekirin tenê antîjenên armancê kod dikin û 5'û 3'herêmên nehatine wergerandin (UTR) hene.Ew teşwîqek berfereh a adaptasyon û bêparêziya xwezayê peyda dikin, nemaze îfadeya antîgenê ya li cîh û veguheztina nîşana xetereyê, û xwedan sepanên jêrîn Taybetmendî ne[2,3]
● Dikare teşwîqek berfireh a adaptebûnê û berevaniya xwezayê peyda bike, nemaze îfadeya antîgenê li cîh û veguheztina nîşana xetereyê
●Dikare bersivek berevaniyê ya "hevseng" çêbike, di nav de bandorkerên hucreyî û hucreyî û bîranîna berevaniyê.
●Dikare antîjenên cihêreng bêyî ku tevliheviya formulasyona derziyê zêde bike
●Pêşkeftina domdar ya potansiyela xweparastinê dikare bi vakslêdana dubare were bidestxistin, û bersivek neparêzî ji hilgirê re tune an kêm e.
● Derziyên mRNA yên bi germî dikarin veguheztin û hilanîna derziyan hêsan bikin
Figure 2: Diyagrama şematîkî ya derziya mRNA û mekanîzmaya derbirrîna antîjenê ya wê [4]
Taybetmendiyên vakslêdanên mRNA
Li gorî vakslêdanên kevneşopî, vakslêdanên mRNA xwedan pêvajoyên hilberîna hêsan, leza pêşkeftina bilez, ne hewcedariya çanda hucreyê, û lêçûnek kêm e.Li gorî vakslêdanên DNA, derziyên mRNA ne hewce ne ku bikevin nav nucleusê û xetera entegrasyona di genoma mêvandar de tune.Nîv-jiyanê dikare bi guherandinê ve were sererast kirin.
Tablo 1: Awantaj û dezawantajên vakslêdanên mRNA
|
| Berjewendî | Kêmasî |
| vakslêdana mRNA | Lêkolîn û pêşkeftina bilez, hilberîna derziyê tenê 40 rojan digire | Bertekek nehewce ya bêparastinê derxînin
|
| Bêîstîqrara mRNA di bin şert û mercên fîzyolojîkî de, hilweşandina hêsan e | Dê di genomê de tevnegere da ku ji mutasyonên dermankirinê yên gengaz dûr bixe
| |
| Ne hewce ye ku nîşanek herêmîkirina navokî, veguheztin | Bandoriya navokî ya ewlehiyê dimîne ku were verast kirin
|
Wêne 3: Nexşeya herikînê ya hilberîn û amadekirina vakslêdana mRNA [4]
Kîta îzolekirina RNA ya vîrusê Foregene
RT-qPCR Hêsan (Yek Gav)
Stratejiyên çêtir ên ji bo amadekirina derziyên mRNA
Ji ber îstîqrara nebaş a mRNA bi xwe, hilweşîna hêsan ji hêla nukleazên di tevnvîsan de, karbidestiya kêm a têketina hucreyê, û kêmasiya wergerandinê, ev kêmasî sepana vakslêdanên mRNA sînordar dikin.Karbidestiya wergerê jî rolek pir girîng dilîze.Wesayîtên radestkirinê dikarin li vektorên vîrus û vektorên ne-viral (tevî lîposom, ne-lîposom, vîrus, nanoparçe, hwd.) bêne dabeş kirin.Ji ber vê yekê, tedbîrên başkirina têkildar hewce ne.Ya jêrîn ji bo amadekirina mRNA stratejiyek başkirina dermankolojîk e[2]
1 Bi girêdana bi faktora destpêka wergerandina eukaryotî 4E (EIF4E) analogên kapê sentez bikin an enzîmên kepkirinê bikar bînin da ku mRNA stabîl bikin û wergera proteînê zêde bikin.
2 Hêmanên li herêma 5'-newergerandî (UTR) û 3'-UTR eyar bikin da ku mRNA aram bike û wergera proteînê zêde bike.
3 Zêdekirina dûvika Poly(A) dikare mRNA aram bike û wergera proteînê zêde bike
4 Nukleosîdên guhertî ji bo kêmkirina aktîvkirina xweparastinê ya xwezayî û zêdekirina wergerê
5 Dermankirina bi RNase III û paqijkirina kromatografiya şil a proteîna bilez (FPLC) dikare çalakkirina berevaniyê kêm bike û wergerandinê zêde bike.
6 Rêz an kodonan xweştir bikin da ku werger zêde bikin
7 Hevradestkirina faktorên destpêkirina wergerê û rêbazên din ên ji bo guhertina werger û immunogenicity
Wêne 4: Veguheztina in vitro (IVT) hilberîna mRNA û pêvajoya kombûnê [5]
Amadekirina mezin a DNA ya plazmidê
Paqijkirina ADN ya plazmîdê bi giranî gemarên wekî RNA, endotoksîna DNA ya dorbera vekirî, proteîna mêvandar û asîdeya nukleî ya mêvandar ji holê radike û bi gelemperî plasmîdê rekombînant vediguherîne E. coli.E. coli di fermentasyona bi drav, paşê veqetandina hişk-avî, û berhevkirina E. coli re derbas dibe.Dûv re E. coli bi lîza alkaline, veqetandina sîteya zexm-avî ya navendî û zelalkirina mîkrofîltasyonê piştî lîzê, ultrafiltration û berhevkirina piştî zelalkirinê, û dûv re jî paqijkirina kromatografiyê tê kirin.
Paqijkirina DNA ya plazmidê:
Foregene General Plasmid Mini Kit
【1】苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[J].免疫学杂志, 2016 (05): 446-449.
【2】Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, et al.Vakslêdanên mRNA - di vakslêdanê de serdemek nû [J].Nirxên Xwezayê Vedîtina Dermanan, 2018.
【3】Kramps T., Elbers K. (2017) Destpêka Vakslêdanên RNA.In: Kramps T., Elbers K. (eds) RNA Vaccines.Methods in Molecular Biology, vol 1499. Humana Press, New York, NY.
【4】Maruggi G, Zhang C, Li J, et al.mRNA wekî Teknolojiya Veguhezbar ji bo Pêşkeftina Vakslêdanê ji bo Kontrolkirina Nexweşiyên Enfeksiyonê[J].Terapiya Molecular, 2019.
【5】Sergio Linares-Fernández, Céline Lacroix, Dirûtina vakslêdana mRNA ji bo balanskirina Bersiva Xweseriya Xwezayî/Adaptive, Trendên Di Dermanê Molekulî de, Cild 26, Hejmar 3,2020, Rûpel 311-323.
Dema şandinê: Tebax-05-2021
