Protokola Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (bê Amûrên Nimûneyê)
Kit Description:
Rasterast lîzata tevna heywanan wekî şablonek ji bo zêdekirina PCR-ê, bêyî derxistina veqetandî ya DNA-yê, bi hesasiyeta bilez û bilind bikar bînin.Pergala dijî-pîsbûnê ya UNG zêde kir da ku erênîyên derewîn ji holê rabike.
◮Paqijkirina DNA-yê ku dem dixwe û biha ne hewce ye.
◮Daxwaza nimûne piçûk e, tenê tovek yek hildin.
◮Ne dermankirinên taybetî yên wekî qirkirin û pelçiqandin hewce ne, û operasyon hêsan e.
◮Pergala PCR-ya optîmîzekirî dihêle ku PCR xwedan taybetmendiyek bilindtir û toleransek bihêztir li hember astengkerên reaksiyona PCR-ê hebe.
Danasîn
Ev kît pergalek tampon a lîzê ya yekta bikar tîne da ku zû DNAya genomîk ji nimûneyên tevna heywanan ji bo reaksiyonên PCR azad bike, ji ber vê yekê ew bi taybetî ji bo ceribandina genetîkî ya mezin maqûl e.
Pêvajoya derxistina DNA ya genomîk ji tampona lîzê di nav 10-30 hûrdeman de li 65°C diqede.Pêvajoyên din ên wekî rakirina proteîn û RNA ne hewce ne, û şopa DNA-ya ku hatî berdan dikare wekî şablon ji bo reaksiyona PCR were bikar anîn.
2×PCR HêsanTMMix (UNG) li şûna dTTP li ser bingeha 2×PCR Easy dUTP bikar tîneTMTevlihev bikin, û enzîma UNG (Uracil-N-glycosylase) lê zêde bike ku dikare di heman demê de şablonê ku dUTP dihewîne xera bike.Berî reaksiyona PCR, enzîma UNG ji bo hilweşandina hilbera PCR ya ku uracil tê de tê bikar anîn.Enzîma UNG dê ti bandorek li ser şablonê ku uracil nehewîne neke, bi vî rengî taybetmendî û rastbûna zêdebûnê misoger dike û di dema ceribandina genetîkî ya mezin de rê li ber hilgirtina hilberên PCR digire.
D-Taq DNA polymerase DNA polymerase ye ku bi taybetî ji hêla Foregene ve ji bo reaksiyonên PCR-ya rasterast hatî pêşve xistin.D-Taq DNA polymerase xwedan toleransek bihêz e ji cûrbecûr frensiyonên reaksiyona PCR re, û dikare bi bandorkerî mîqdarên şopa DNA-yê di pergalên reaksiyonê yên cihêreng ên tevlihev de zêde bike, û leza zêdekirinê dikare bigihîje 2Kb / min, ku bi taybetî ji bo reaksiyona PCR-ya rasterast maqûl e.
pêkhateyên Kit
| Beş I | Tampon AL |
| Foregene Protease | |
| 6× Tampon Barkirina DNA | |
| Beş II | 2×PCR HêsanTMMix(UNG) |
Taybetmendî & avantajên
■Paqijkirina DNA ya dem-dixwe û biha tune
■ Daxwaza nimûneyê piçûk e, bi qasî 5 mg tevna heywanan dikare were ceribandin.
■ Tedawiya taybetî wek qijkirin û perçiqandin hewce nake, û emeliyat hêsan e.
■ Pergala PCR ya optîmîzekirî dihêle ku PCR li hember înhîbîtorên reaksiyona PCR xwedî taybetmendî û toleransek bihêztir be.
■ Pergala PCR ya dijî qirêj 2×PCR hêsanTMMix (UNG) bi bandor qirêjiya ku ji hêla hilberên PCR ve hatî çêkirin ji holê radike û taybetmendî û rastbûna mezinbûnê misoger dike.
Parametreyên kit
Serlêdan: cûrbecûr destmalên heywanan.
ADNya ku ji lîza nimûneyê derketiye: tenê wekî şablonek PCR tê bikar anîn.
Kit dikare ji bo van mebestan were bikar anîn: Naskirina transgenosis, genotipkirina heywanan, hwd.
Herikîna xebatê
Storage û Refê jiyana
Divê beşa I ya vê kîtê di 2-8 de were hilanîn℃.
Reagent Buffer AL dikare 12 mehan di bin şert û mercên hişk de were hilanîn;ew dikare di 2-8 de were hilanîn℃ji bo hilanîna dirêj.
Reagent Foregene Protease xwedan formula yekta ye.Ji bo ku çalakî û aramiya wê bicîh bikin, ji kerema xwe wê li 4 hilînin℃ji bo 12 mehan.
Reagent 6×Tampona Barkirina DNA dikare li 4 were hilanîn℃an -20℃ji bo demeke dirêj.
Beş II ya vê kîtê divê di -20 de were hilanîn℃.
Reagent 2×PCR hêsanTMMix (UNG), heke pir caran were bikar anîn, ew dikare di 4 de jî were hilanîn℃ji bo hilanîna kurt (di nav 10 rojan de bikar bînin).
