Kîta îzolekirina RNA ya xwînê
Kit Description:
Pisîk.No.RE-04011/04013
Ji bo paqijkirina RNA ya tevahî ya xwînê 104 ≤ Hucreyên Xwîna Spî ≤ 107
Bi lez û bez RNA xwînê ji hucreyên xwînê yên spî veqetînin û paqij bikin.
-Ne hewce ye ku meriv li ser hilweşîna ARN-ê bixebite.Tevahiya kîteya RNase-Bê-free ye
-Hêsan-hemû operasyon li germahiya odeyê têne qedandin
-Zû - operasyon dikare di 20 hûrdeman de were qedandin
- Hilberîna RNA ya bilind: Stûna tenê RNA û formula yekta dikare RNA-yê bi bandor paqij bike.
-Ewle - reagentek organîk nayê bikar anîn
-Kapasîteya hilberandina nimûneyê ya mezin-her car dikare heya 200μl nimûneyan were hilanîn.
-Qalîteya bilind-ARN-ya paqijkirî pir paqij e, ji proteîn û nepakiyên din bêpar e, û dikare bi cûrbecûr sepanên ceribandinê yên jêrîn bicîh bîne.
Danasîn
Kit stûna spin û formula ku ji hêla pargîdaniya me ve hatî pêşve xistin qebûl dike, ku dikare bi rengek bikêrhatî RNA-ya tevahî ya paqij û kalîteya bilind ji xwîna tevahî antîkoagulasyon derxe.Kit lîzata hucreya sor a xwînê (Buffer RCL) peyda dike, ku dikare zû û bi bandor hucreyên xwînê yên sor lîz bike û hucreyên xwînê yên spî bigire.Colunm-Paqijkirina DNA-ya bikêr dikare bi hêsanî lîzên supernatant û hucreyê ji hev veqetîne û ADNya genomîk bihelîne û jê rake.Operasyon hêsan e û dem-teserûfê ye;Stûna tenê-ARN dikare RNA-yê bi bandor ve girêbide, û bi formulek bêhempa, ew dikare di heman demê de hejmareke mezin ji nimûneyan pêvajoyê bike.
Tevahiya pergala RNase-Free RNA-ya ku hatiye derxistin ne-hilweşe dike;Pergala şuştina tampon RW1 û Buffer RW2 ARN-ya hatî bidestxistin ji proteîn, DNA, îyon û qirêjiya pêkhateya organîk bêpar dike.
Naveroka Kit
| Kîta îzolasyona RNA ya tevahî ya xwînê | ||
| Kit pêkhatî | RE-04011 | RE-04013 |
| 50 car | 200 car | |
| Tampon RCL (10×) | 52,5 ml | 210 ml |
| Tampon BRL1* | 30 ml | 120 ml |
| Tampon BRL2 | 18 ml | 66 ml |
| Tampon RW1* | 25 ml | 100 ml |
| Tampon RW2 | 24 ml | 96 ml |
| RNase-Bê ddH2 O | 10 ml | 40 ml |
| Stûna RNA-tenê | 50 set | 200 set |
| Stûna Paqijkirina DNA | 50 set | 200 set |
| destî | 1 kopî | 1 kopî |
Taybetmendî & avantajên
-Ne hewce ye ku meriv li ser hilweşîna ARN-ê bixebite.Tevahiya kîteya RNase-Bê-free ye.
-Hêsan-hemû operasyon li germahiya odeyê têne qedandin.
-Zû - operasyon dikare di 20 hûrdeman de were qedandin.
-Rêberdana RNA ya bilind: Stûn-tenê RNA û formula yekta dikare RNA-yê bi bandor paqij bike.
-Ewle - reagentek organîk nayê bikar anîn.
-Kapasîteya hilberandina nimûneyê ya mezin-her car dikare heya 200μl nimûneyan were hilanîn.
-Qalîteya bilind-ARN-ya paqijkirî pir paqij e, ji proteîn û nepakiyên din bêpar e, û dikare bi cûrbecûr sepanên ceribandinê yên jêrîn bicîh bîne.
Parametreyên kit
Serlêdana Kit:
Ew ji bo derxistin û paqijkirina RNA ya tevahî ji xwîna tevahî mammalan maqûl e.
Herikîna xebatê
Şertên hilanînê
Buffer RCL (10×) divê di 2-8 ℃ de were hilanîn;pêkhateyên din ên kîtê dikarin li germahiya odeyê (15-25 ℃) di bin şert û mercên hişk de werin hilanîn, û dikarin 12 mehan werin hilanîn.Buffer BRL1 piştî lê zêdekirina β-mercaptoethanol (vebijarkî) 1 meh dikare li 4 ℃ were hilanîn.
Nîşe: Ger di germahiya nizm de were hilanîn, çareserî ber bi baranê ve dibe.Bê guman berî ku bikar bînin çareseriyek di kîtê de li germahiya odeyê bi cîh bikin.Ger hewce be, wê 10 hûrdeman di hemamek avê ya 37°C de germ bikin da ku berfê bihelînin, û berî bikar bînin baş tevlihev bikin.
Rêbernameyên ji bo analîzkirina pirsgirêkan
The following is an analysis of the problems that might be encountered in the extraction of viral RNA. We wish it would be helpful to your experiment. In addition, for other experimental or technical problems other than operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. Contact us if you need at : 028-83361257or E-mail：Tech@foregene.com。
ARN nayê derxistin an jî hilberîna asîda nukleîk kêm e
Bi gelemperî gelek faktor hene ku bandorê li kargêriya hilanînê dikin, wek mînak: naveroka RNA-yê nimûne, rêbaza xebitandinê, qebareya hilanînê, hwd.
Analîza sedemên hevpar:
1.Heşma cemedê an santrîfujkirina germahiya nizm (4 ° C) di dema xebatê de.
Pêşniyar: Germahiya odeyê (15-25 ° C) xebitandin, qet hemamê qeşayê û santrîfuja germahiya nizm.
2. Hilberîna nimûne ya nerast an hilanîna nimûne ji bo pir dirêj.
Pêşniyar: Nimûneyên di -80 ° C de hilînin an di nîtrojena şil de bicemidînin, û ji karanîna dubare ya cemidî-germkirinê dûr bixin;hewl bidin ku nimûneyên nû yên berhevkirî ji bo derxistina RNA bikar bînin.
3.Lîza nimûneyê ne bes
Pêşniyar: Ji kerema xwe piştrast bikin ku nimûne û çareseriya xebatê (Acrylamide Linear) bi tevahî tevlihev bûne û ji bo 10 hûrdeman li germahiya odeyê (15-25 ° C) hatine inkub kirin.
4.Eluent bi xeletî hate zêdekirin
Pêşniyar: Piştrast bikin ku RNase-Free ddH2O li nîvê membrana stûna paqijkirinê were zêdekirin.
5.Improper volume of ethanol anhydrous di Buffer viRW2
Pêşniyar: Ji kerema xwe talîmatan bişopînin, hêjmara rast a etanolê bêhîd li Buffer viRW2 zêde bikin û berî ku kîtê bikar bînin wan baş tevlihev bikin.
6. Bikaranîna nimûneya neheq.
Pêşniyar: 200 μl nimûne ji 500 μl Buffer viRL.Hejmara zêde ya nimûneyê dê bibe sedema kêmbûna rêjeya derxistina RNA.
7.Hejma elutionê nebaş an jî elution netemam.
Pêşniyar: Hêjeya eluentê ya stûna paqijkirinê 30-50μl e;heke bandora helandinê ne têrker be, tê pêşniyar kirin ku ddH-ya RNase-Free ya berî-germkirî lê zêde bikin.2O û dema danîna li germahiya odeyê, wek 5-10 min, dirêj bikin
8.Stûna paqijkirinê piştî şuştina di Buffer viRW2 de bermayiya etanolê heye.
Pêşniyar: Ger etanol piştî şuştina di Buffer viRW2 û santîfujkirina lûleya vala 2 hûrdeman hîn bimîne, stûna paqijkirinê dikare 5 hûrdem li germahiya odeyê were hiştin piştî santrîfujkirina lûleya vala da ku etanola mayî bi tevahî were rakirin.
Hilweşîna molekulên RNA yên paqijkirî
Qalîteya RNA-ya paqijkirî bi faktorên wekî hilanîna nimûneyê, qirêjiya RNase, û xebitandinê ve girêdayî ye.
Analîza sedemên hevpar:
1.Nimûneyên hatine berhevkirin di wextê de nehatine rizgarkirin.
Pêşniyar: Ger nimûne piştî berhevkirinê di wextê xwe de neyê bikar anîn, ji kerema xwe wê tavilê li -80 ℃ an nîtrojena şil hilînin.Ji bo derxistina molekulên ARNyê, hewl bidin ku nimûneyên nû yên berhevkirî gava ku gengaz be bikar bînin.
2.Nimûneyên berhevkirî gelek caran dicemidin û dihelin.
Pêşniyar: Di dema berhevkirin û hilanînê de ji dubarekirin û cemidandinê (ji carekê zêdetir nebe) xwe dûr bigirin, wekî din dê hilberîna asîda nukleîk kêm bibe.
3.RNase di salona emeliyatê de hat kirin an jî destmal, maske û hwd.
Pêşniyar: Derxistina ceribandina molekulên ARNyê çêtirîn li jûreyek xebitandina RNA ya cihê tê kirin, û tabloya ceribandinê berî ceribandinê were paqij kirin.Di dema ceribandinê de destik û maskên yekcar li xwe bikin da ku ji hilweşîna RNA ya ku ji hêla danasîna RNase ve hatî çêkirin dûr bixin.
4.Reagent di dema karanîna de ji hêla RNase ve tê qirêj kirin.
Pêşniyar: Ji bo ceribandinên têkildar Kita Veqetandina RNA ya Vîrusê ya nû veguherînin.
5. Tevliheviya RNase ya lûleyên santrîfujê, tîpên pîpetan, hwd. Pêşniyar: Piştrast bikin ku lûleyên santrîfujê, lûleyên pîpetê û pîpetan tev bê RNase ne.
Molekulên RNA yên paqijkirî bandor li ceribandinên jêrîn kirin
Molekulên RNA yên ku ji hêla stûna paqijkirinê ve têne paqij kirin dê bandorê li ceribandinên jêrîn bikin heke pir îyon an proteînên xwê hebin, wek: veguheztina berevajî, Blot Bakur, hwd.
1.Di molekulên ARNyê yên helbûyî de îyonên xwê yên mayî hene.
Pêşniyar: Piştrast bikin ku hecmê rast ê etanola bêhîd li Buffer viRW2 hatiye zêdekirin, û stûna paqijkirinê du caran li gorî leza santrîfujasyonê ya rast a li ser rêwerzên xebitandinê bişon. Heke hîn îyonên xwê mane, hûn dikarin Buffer viRW2 li stûna paqijkirinê zêde bikin, û 5 hûrdeman li germahiya odeyê bihêlin.Dûv re santrîfûjasyonê bikin da ku gemariya îyonên xwê heya radeya herî mezin jêbirin
2.Di molekulên ARNyê yên helbûyî de etanolê mayî heye
Pêşniyar: Carekê piştrast kir ku stûnên paqijkirinê ji hêla Buffer viRW2 ve hatine şuştin, santrafîjasyona lûleya vala li gorî leza centrifûgal a li ser rêwerzên xebitandinê pêk bînin.Ger hîn etanolê mayî hebe, ew dikare 5 hûrdeman li germahiya odeyê were hiştin piştî santrîfujasyonek lûleke vala da ku etanola mayî herî zêde jê bibe.
Manuals Instruction:
Destûra Rêvebiriya Kîtê ya Îsolasyona RNA ya Viral
