Çîn Çîn Çîn Çîn ji bo 2× Premix Concentrated ji bo Nimûneya Nepaqijkirî ya Rast-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U
Rêxistin li ser konsepta prosedurê "rêveberiya zanistî, serdestiya kalîteya bilind û bikêrhatî, serdestiya kirêdar ji bo Hilberînerê Chinaînê ji bo 2× Premix Concentrated ji bo Nimûneya Nepaqijkirî ya Rast-Time PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Karsaziya me ji bo dayîna xerîdaran bi bihayek girîng û ewledar ji kerema xwe re, ji kerema xwe re her xerîdarek hilberên bi kalîteya bilind û ewledar re peyda dike.
Rêxistin li ser konsepta prosedurê didomîne "rêveberiya zanistî, serdestiya kalîteya bilind û bikêrhatî, kiriyar ji boÇîn Taq DNA Polymerase û Qpcr, Pargîdaniya me xwedan hêzek berbiçav e û xwedan pergalek torê ya firotanê ya domdar û bêkêmasî ye.Em dixwazin ku em bi hemî xerîdarên li hundur û derveyî welêt re li ser bingeha berjewendîyên hevdu re têkiliyên karsaziya saxlem saz bikin.
Prensîbên sêwirana primera PCR-ya Real Time
Pêşî Primer û Reverse Primer
Ji bo Real Time PCR, sêwirana primer pir girîng e.Primer bi taybetmendî û karbidestiya zêdekirina PCR-ê ve girêdayî ne, û dikarin li gorî prensîbên jêrîn werin sêwirandin:
- Dirêjahiya destpêkê: 18-30 bp.
- Naveroka GC: 40-60%.
- Nirxa Tm: Nermalava sêwirana Primer, wekî Primer 5, dikare nirxa Tm ya aşîtê bide.Nirxên Tm yên primerên jorîn û jêrîn divê bi qasî ku pêkan nêzîk bin.Formula hesabkirina Tm jî dikare were bikar anîn: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Dema ku PCR tête kirin, germahiyek li jêr nirxa Tm ya primer a 5 °C bi gelemperî wekî germahiya paqijkirinê tê hilbijartin (zêdebûna têkildar a germahiya paqijkirinê dikare taybetmendiya reaksiyona PCR zêde bike).
- Primer û hilberên PCR:
- Dirêjahiya hilbera zêdekirina PCR-a sêwiranê bi tercîh 100-150 bp e.
- Pêdivî ye ku pêşmercên sêwiranê yên di qada strukturî ya duyemîn a şablonê de bi qasî ku gengaz were dûr xistin.
- Ji avakirina 2 an jî zêdetir bingehên temamker di navbera 3' dawîn a primerên jorîn û jêrîn de dûr bisekinin.
- Bingeha termînalê ya Primer 3' nikare bi 3 G an C yên paşîn ên din re hebe.
- Pîmer bixwe nikarin xwedan strukturên temamker bin, wekî din dê avahiyek porê çêbibe, ku bandorê li zêdekirina PCR bike.
- Pêdivî ye ku ATCG di rêza pêşîn de bi qasî ku gengaz be were belav kirin, û bingeha termînalê ya 3' divê wekî T were dûr kirin.
Pêvok1: Cell DirectRT-qPCR Kit component pakêta lêzêdekirina
1.Cell Lysis Çareseriya
Çareseriya Lîza Hucreyê | |||
pêkhateyên Kit (Pergala lîzê ya 24-kanî / baş) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Parez | Tampon CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ParII | Eraser DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
pêkhateyên Kit (20 μl pergala reaksiyonê) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNase-Bê ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Mix | ||
pêkhateyên Kit (20 μl pergala reaksiyonê) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 ml |
RNase-Bê ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Rêxistin li ser konsepta prosedurê "rêveberiya zanistî, serdestiya kalîteya bilind û bikêrhatî, serdestiya kirêdar ji bo Hilberînerê Chinaînê ji bo 2× Premix Concentrated ji bo Nimûneya Nepaqijkirî ya Rast-Time PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, Karsaziya me ji bo dayîna xerîdaran bi bihayek girîng û ewledar ji kerema xwe re, ji kerema xwe re her xerîdarek hilberên bi kalîteya bilind û ewledar re peyda dike.
Çîn Manufacturer ji boÇîn Taq DNA Polymerase û Qpcr, Pargîdaniya me xwedan hêzek berbiçav e û xwedan pergalek torê ya firotanê ya domdar û bêkêmasî ye.Em dixwazin ku em bi hemî xerîdarên li hundur û derveyî welêt re li ser bingeha berjewendîyên hevdu re têkiliyên karsaziya saxlem saz bikin.
Prensîbên sêwirana primera PCR-ya Real Time
Pêşî Primer û Reverse Primer
Ji bo Real Time PCR, sêwirana primer pir girîng e.Primer bi taybetmendî û karbidestiya zêdekirina PCR-ê ve girêdayî ne, û dikarin li gorî prensîbên jêrîn werin sêwirandin:
- Dirêjahiya destpêkê: 18-30 bp.
- Naveroka GC: 40-60%.
- Nirxa Tm: Nermalava sêwirana Primer, wekî Primer 5, dikare nirxa Tm ya aşîtê bide.Nirxên Tm yên primerên jorîn û jêrîn divê bi qasî ku pêkan nêzîk bin.Formula hesabkirina Tm jî dikare were bikar anîn: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).Dema ku PCR tête kirin, germahiyek li jêr nirxa Tm ya primer a 5 °C bi gelemperî wekî germahiya paqijkirinê tê hilbijartin (zêdebûna têkildar a germahiya paqijkirinê dikare taybetmendiya reaksiyona PCR zêde bike).
- Primer û hilberên PCR:
- Dirêjahiya hilbera zêdekirina PCR-a sêwiranê bi tercîh 100-150 bp e.
- Pêdivî ye ku pêşmercên sêwiranê yên di qada strukturî ya duyemîn a şablonê de bi qasî ku gengaz were dûr xistin.
- Ji avakirina 2 an jî zêdetir bingehên temamker di navbera 3' dawîn a primerên jorîn û jêrîn de dûr bisekinin.
- Bingeha termînalê ya Primer 3' nikare bi 3 G an C yên paşîn ên din re hebe.
- Pîmer bixwe nikarin xwedan strukturên temamker bin, wekî din dê avahiyek porê çêbibe, ku bandorê li zêdekirina PCR bike.
- Pêdivî ye ku ATCG di rêza pêşîn de bi qasî ku gengaz be were belav kirin, û bingeha termînalê ya 3' divê wekî T were dûr kirin.
Pêvok1: Cell DirectRT-qPCR Kit component pakêta lêzêdekirina
1.Cell Lysis Çareseriya
Çareseriya Lîza Hucreyê | |||
pêkhateyên Kit (Pergala lîzê ya 24-kanî / baş) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
Parez | Tampon CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
Tampon ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
ParII | Eraser DNA | 400 μl | 1 ml × 2 |
RT Mix | |
pêkhateyên Kit (20 μl pergala reaksiyonê) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× Direct RT Mix | 800 μl |
RNase-Bê ddH2O | 1,7 ml × 2 |
qPCR Mix | ||
pêkhateyên Kit (20 μl pergala reaksiyonê) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× Direct qPCR Mix-Taqman | 1 ml × 2 | 1,7 ml × 6 |
20× ROX Reference Dye | 40 μl | 200 ml |
RNase-Bê ddH2O | 1,7 ml | 10 ml |
Manuals Instruction: