Foreasy Taq DNA Polymerase
Kit Description:
◮Taybetmendiya bilind: Enzîm xwedan çalakiyek destpêkek germ e.
◮Zêdekirina Bilez: 10 sec/kb.
◮Şablonek pir adapteyî: dikare were bikar anîn da ku bi karîgerî zêdekirina nirxa bilind a GC, şablonên DNA-yê yên cûrbecûr-zehmet-ê zêde bike.
◮Baweriya bihêz: Taq Enzîma asayî 6 caran.
◮Stabiliya germî ya bihêz: Ew dikare hefteyek li 37 °C were danîn û ji% 90 zêdetir çalakiya xwe diparêze.
Terîf
Foreasy Taq DNA Polymerase enzîmek nû ya Taq e ku di bakteriya endezyariya Escherichia coli de ji hêla teknolojiya vejenê ya genê ve tête diyar kirin.Enzîm bixwe xwedan çalakiyek destpêkek germ e û dikare ji bo PCR û qPCR-ya kevneşopî were bikar anîn;çalakiya wê ya 5'→3' DNA polymerase û 5'→3' çalakiya exonuclease heye, lê 3'→5' çalakiya exonuclease tune.
pêkhateyên Kit
| Perçe | IM-01011 | IM-01012 | IM-01013 |
| Foreasy Taq DNA Polymerase(5 U/μL) | 5000 U (1 mL) | 50 KU (10 mL) | 500 KU (100 mL) |
| 2× Taq Reaksiyona Tamp | 25 ml × 5 | 250 ml × 5 | 500 mL × 25 |
Taybetmendî & avantajên
- Taybetmendiya bilind: Enzîm xwedan çalakiyek destpêkek germ e.
- Zêdekirina Bilez: 10 sec/kb.
- Şablonek pir adapteyî: dikare were bikar anîn da ku bi karîgerî zêdekirina nirxa bilind a GC, şablonên DNA-yê yên cûrbecûr-zehmet-ê zêde bike.
- Baweriya bihêz: Taq Enzîma asayî 6 caran.
- Îstîqrara germî ya bihêz: Ew dikare hefteyek li 37 °C were danîn û ji% 90 zêdetir çalakiya xwe diparêze.
sepanê Kit
Pergalên cihêreng ên PCR/qPCR û pergalên PCR rasterast
Amplification PCR ya parçeyên DNA
Etîketkirina DNA
Rêzkirina DNA
PCR A-tailed
U Pênase
1U: Mîqdara enzîma ku ji bo tevlêkirina 10 nmol deoksînukleotîdan di nav maddeya ku di asîd de nayê çareser kirin bi karanîna DNA ya sperma salmonê ya aktîfkirî wekî şablon/primer ji bo 30 hûrdeman di 74°C de hewce dike.
Rewşa Reaksiyonê
| Germî | Dem | Zîvirok |
| 37°C | 5 min | 1 |
| 94°C | 5 min | 1 |
| 94°C | 10 Secs | 35 |
| 60°C | 10 Secs | |
| 72°C | 20 çirk/kb | |
| 72°C | 2 min | 1 |
Embarkirinî
-20 ± 5 °C ji bo 2 salan an di -80 °C de ji bo hilanîna demdirêj.
No sînyalên amplification
1.Taq DNA Polymerase ya di kîtê de ji ber hilanîna nerast an bidawîbûna kîtê çalakiya xwe winda dike.
Pêşniyar: Şertên hilanînê yên kîtê piştrast bikin;ji nû ve mîqdarek maqûl a Taq DNA Polymerase li pergala PCR zêde bikin an jî ji bo ceribandinên têkildar Kitek PCR-ya Real Time ya nû bikirin.
2.Di şablonê ADNyê de gelek astengkerên Taq DNA Polymerase hene.
Pêşniyar: Şablonê ji nû ve paqij bikin an mîqdara şablonê ku tê bikar anîn kêm bikin.
3.Kansa Mg2+ ne guncaw e.
Pêşniyar: Hêjeya Mg2+ ya 2× Miksa PCR ya rastîn a ku em pêşkêş dikin 3,5 mM e.Lêbelê, ji bo hin primers û şablonên taybetî, dibe ku giraniya Mg2+ bilindtir be.Ji ber vê yekê, hûn dikarin rasterast MgCl2 lê zêde bikin da ku berhevoka Mg2+ xweş bikin.Ji bo xweşbîniyê her carê tê pêşniyar kirin ku Mg2+ 0.5mM zêde bikin.
4. Mercên zêdekirina PCR ne guncaw in, û rêza pêşîn an jî berhevokê negunca ye.
Pêşniyar: rastbûna rêzika aşîkarê piştrast bikin û arîkar xirab nebûye;heke sînyala zêdekirinê ne baş be, hewl bidin ku germahiya pîjkirinê kêm bikin û bi guncav kombûna primerê rast bikin.
5.Hejmara şablonê pir hindik an pir zêde ye.
Pêşniyar: Dilbûna gradientê ya xêzkirina şablonê pêk bînin, û ji bo ceribandina PCR-ya Real Time de kombûna şablonê bi bandora PCR ya çêtirîn hilbijêrin.
NTC xwedan nirxa floransê pir zêde ye
1.Tirêbûna reagentê ku di dema xebatê de hatî çêkirin.
Pêşniyar: Ji bo ceribandinên Real Time PCR bi reagentên nû veguherînin.
2.Di dema amadekirina pergala reaksiyonê ya PCR de tevlihevî çêbû.
Pêşniyar: Di dema xebatê de tedbîrên parastinê yên pêwîst bigirin, wek: girtina destikên lateksê, bi kar anîna tîpek pîpetê bi parzûnê, hwd.
3.Pêşkêş têne hilweşandin, û hilweşîna primers dê bibe sedema zêdekirina netaybetî.
Pêşniyar: Elektroforeza SDS-PAGE bikar bînin da ku diyar bikin ka prîmer xera bûne an na, û ji bo ceribandinên Real Time PCR wan bi primerên nû veguherînin.
Primer dimer an zêdekirina ne-taybetî
1.Kêmbûna Mg2+ ne guncaw e.
Pêşniyar: Hêjeya Mg2+ ya 2× Real PCR EasyTM Mix ku em pêşkêş dikin 3,5 mM e.Lêbelê, ji bo hin primers û şablonên taybetî, dibe ku giraniya Mg2+ bilindtir be.Ji ber vê yekê, hûn dikarin rasterast MgCl2 lê zêde bikin da ku berhevoka Mg2+ xweş bikin.Ji bo xweşbîniyê her carê tê pêşniyar kirin ku Mg2+ 0.5mM zêde bikin.
2.Germahiya PCR-ê ya anneal pir kêm e.
Pêşniyar: Her carê germahiya PCR-ê 1℃ an 2℃ zêde bikin.
3. Hilbera PCR pir dirêj e.
Pêşniyar: Dirêjahiya hilbera Real Time PCR divê di navbera 100-150 bp de be, ne ji 500 bp.
4.Pêşkêş têne hilweşandin, û hilweşîna primers dê bibe sedema xuyangkirina amplification taybetî.
Pêşniyar: Elektroforeza SDS-PAGE bikar bînin da ku diyar bikin ka prîmer xera bûne an na, û ji bo ceribandinên Real Time PCR wan bi primerên nû veguherînin.
5. Pergala PCR nerast e, an jî pergal pir piçûk e.
Pêşniyar: Pergala reaksiyona PCR pir piçûk e dê bibe sedem ku rastbûna tespîtê kêm bibe.Baştir e ku meriv pergala reaksiyonê ya ku ji hêla amûra PCR-ya jimareyî ve hatî pêşniyar kirin bikar bîne da ku ezmûna PCR-ya Real Time ji nû ve were meşandin.
Dubarebûna qels a nirxên mîqdar
1.Alav nexebite.
Pêşniyar: Dibe ku di navbera her qulika PCR a amûrê de xeletî hebin, ku di dema rêvebirina germahiyê an tespîtkirina germahiyê de ji nû ve hilberandinek xirab çêdibe.Ji kerema xwe li gorî rêwerzên amûra têkildar kontrol bikin.
2. Paqijiya nimûne ne baş e.
Pêşniyar: Nimûneyên nepaqij dê bibe sedema veberhênana qels a ceribandinê, ku tê de paqijiya şablon û aşîkar tê de heye.Baştir e ku meriv şablonê ji nû ve paqij bike, û primers çêtirîn ji hêla SDS-PAGE ve têne paqij kirin.
3. Dema amadekirina pergala PCR û hilanînê pir dirêj e.
Pêşniyar: Pergala Real Time PCR-ê ji bo ceribandina PCR-ê tavilê piştî amadekirinê bikar bînin û wê pir dirêj nehêlin.
4. Mercên zêdekirina PCR ne guncaw in, û rêza pêşîn an jî berhevokê negunca ye.
Pêşniyar: rastbûna rêzika aşîkarê piştrast bikin û arîkar xirab nebûye;heke sînyala zêdekirinê ne baş be, hewl bidin ku germahiya pîjkirinê kêm bikin û bi guncav kombûna primerê rast bikin.
5. Pergala PCR nerast e, an jî pergal pir piçûk e.
Pêşniyar: Pergala reaksiyona PCR pir piçûk e dê bibe sedem ku rastbûna tespîtê kêm bibe.Baştir e ku meriv pergala reaksiyonê ya ku ji hêla amûra PCR-ya jimareyî ve hatî pêşniyar kirin bikar bîne da ku ezmûna PCR-ya Real Time ji nû ve were meşandin.
-
Kîta PCR ya rasterast a Tîsa Heywanê (bê Nimûne ...
-
Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (bêyî Nimûne...
-
Kita îzolekirina DNA ya tevna heywanan Derxistina DNA ...
-
Kita îzolasyona RNA ya tevahî ya heywanan Derketina RNA ya tevahî...
-
Kita Tevahiya ARN-a îzolekirinê ya xaneyê
-
General Plasmid Mini Kit General Plasmid DNA Ex...
