Rêjeya hindik a A260/A230 bi gelemperî ji ber nepakîyên ku bi dirêjahiya pêlê ya herî zêde di 230nm de vedihewîne pêk tê.Ka em bibînin ka van nepakî çi tê de hene:

• qirêjên hevpar	Dirêjahiya pêlê vegirtinê	Bandora rêjeya
  Protein	~230nm û 280nm	Kêmkirina hevdemî ya A260/A 280û A260/A 280rêjeyên
  xwê Guanidine	220-240 nm	A kêm bikin260/A 280têkilî
  Phenol	~ 270nm	-
  Trizol	~ 230nm û 270nm	A kêm bikin260/A 280têkilî
  EDTA	~ 230nm	A kêm bikin260/A 280têkilî
  Etanol	230-240 nm	A kêm bikin260/A 280têkilî

 
 
 
Dirêjahiya pêlê vegirtinê û nirxa berevajî ya qirêjên hevpar

Pqirêjiya roteînê
Di pêvajoya derxistina asîda nukleîk de qirêjiya proteînê dikare wekî qirêjiya herî gelemperî were hesibandin.Proteîn di navbera qonaxa avê ya jorîn û ya jêrîn de heyeorganîkqonaxa .Germbûn dê di heman demê de rêjeya A260/A280 û A260/A230 kêm bike, û rêjeya A260/A230 dê ji rêjeya A260/A280 zelaltir biguheze.
Di dema paşîn deveguhertina berevajîor reaksiyonên qPCR, bermahiyên proteîn dikarin fonksiyona enzîmê asteng bikin an jî asteng bikin.Awayê çêtirîn ku meriv ji gemarîbûna proteîn dûr bixe ev e ku meriv prensîba "li şûna pir hindik, gelek caran hindik hindik" di hişê xwe de bihêle dema aspirasyona supernatant.

2. qirêjiya Guanidinium
hîdrochloride (GuHCl) û guanidine thiocyanate (GTC) xwedan bandora proteînên denaturasyonê ne, ku dikarin di pêvajoya derxistina asîda nukleîk de zû membranên hucreyê hilweşînin, û dibe sedema denaturasyona proteîn û baranê.Dirêjahiya pêla vegirtinê ya GuHCl û GTC di navbera 220-240 nm de ye, ûxwêya guanidinium ya mayî dê rêjeya A260/A230 kêm bike.Her çend xwêya guanidinium ya mayî dê rêjeyê kêm bike,bandora li ser ceribandinên jêrzemînê bi rastî ne kêm e.

3. Têrbûna Trizol
Hêmana sereke ya Trizol fenol e.Fonksiyona sereke ya fenolê lîzkirina şaneyan û berdana proteînan û maddeyên asîda nukleîk di şaneyan de ye.Her çend fenol dikare proteînan bi bandor bikêr bike, ew nikare bi tevahî çalakiya RNase asteng bike.Ji ber vê yekê, 8-hydroxyquinoline, guanidine isothiocyanate, β-merkaptoetanol, û hwd li TRIzol têne zêdekirin da ku RNase-a endojen û biyanî asteng bikin.
Dema ku RNA-ya hucreyî derdixe, Trizol dikare zû hucreyan lîz bike û nukleaza ku ji hucreyan derketiye asteng bike, û Trizolê mayî dê rêjeya A260/A230 bi girîngî kêm bike.
Rêbaza pêvajoyê: Dema ku santrîfûj dike, divê were zanîn ku fenolê li Trizol di qonaxa avê de di bin şert û mercên 4 ° û germahiya odeyê de bi hêsanî tê çareser kirin.

4. Bermayiya etanolê
Etanol di pêvajoya dawîn de tê bikar anîn da ku ADNyê bişewitîne dema ku îyonên xwê yên ku dibe ku bi ADNyê ve girêdayî bin dihelîne.Dirêjahiya pêlê ya vegirtinê ya herî bilindlûtkeya vegirtinê yaetanol jî di 230-240 nm de ye, kudê rêjeya A260/A230 jî kêm bike.
Rêbaza dûrxistina bermahiyên etanolê dikare di dema şuştina paşîn de du caran were dûbare kirin, ku di nav avê de derbikeve.hood fumeji bo du deqeyan ji bo ku etanolê bi tevahî bihele berî ku tampon ji bo elusyonê zêde bike.
Lêbelê, divê were zanîn ku rêje tenê nîşanek nirxandina kalîteya RNA ye.Ger operasyonên jorîn bi hişkî werin rêve kirin, dûrketina di navbera rêje û rêza standard de dê bandorek mezin li ser ceribandinên jêrîn neke.
Berhemên Têkildar:
Kîta îzolasyona RNA ya Tevahiya Heywanan
Kîta îzolasyonê ya ARN-a Total a nebatê
Kîta îzolasyona RNA ya tevayî ya hucreyê
Plant Total RNA Kit Isolation Plus