Direct RT-qPCR Kit II
Kit Description:
◮Kit RT-qPCR rasterast, bi karanîna Foreasy Reverse Transcriptase û Foreasy HS Taq DNA Polymerase ku ji hêla Foregene ve pêşve diçin, bi tamponek reaksiyonê ya bêhempa, vê kîtê bi berxwedan û lihevhatina xurt çêdike, û ew rasterast dikare reaksiyonê ceribandina pergala Foregene Lysis wekî şablonê bikar bîne.Ev kît dikare ji bo pêşkeftina kîta tespîtkirina asîda nukleîdî ya COVID-19 û bakteriyên din ên pathogenîk ên kîta tespîtkirina asîda nukleîdî bicîh bike.
Terîf
Kit RT-qPCR rasterast, tampon RT-qPCR-ya veqetandî ya pakkirî, Polîmeraza DNA ya Foreasy HS Taq-ê ya bi bandor peyda dike.û Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV),çêkirina wê ji bo çêkirina kîtên paşîn û verastkirina pergalê, di nav verastkirina hêsan de hêsan dike.
Kit RT-qPCR rasterast, bi karanîna Foreasy Reverse Transcriptase û Foreasy HS Taq DNA Polymerase ku ji hêla Foregene ve pêşve diçin, bi tamponek reaksiyonê ya bêhempa, vê kîtê bi berxwedan û lihevhatina xurt çêdike, û ew rasterast dikare reaksiyonê ceribandina pergala Foregene Lysis wekî şablonê bikar bîne.Ev kît dikare ji bo pêşkeftina kîta tespîtkirina asîda nukleîdî ya COVID-19 û bakteriyên din ên pathogenîk ên kîta tespîtkirina asîda nukleîdî bicîh bike.
Ev kît rasterast dikare bibe pêkhateya hilbera IVD, bi hêsanî û bilez bikar bîne.Ew tenê verastkirina hêsan hewce dike, bêyî ku dîsa pêşve bibe.
Specifications
500 T, 50,000 T
pêkhateyên Kit
| naveroka kit (20 μL pergala reaksiyonê) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50.000 T | |
| Foreasy Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL×1 | 1 ml×5 |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 100 μL×1 | 1 ml× 10 |
| 2× Direct RT-qPCRTampon | 1 ml × 5 | 500 ml × 1 |
| Ders | 1 | 1 |
Gavên Operating
A: Şablon û reagentê amade bikin
1. Şablona RNA ya amadekirî (Pêşniyar kirin ku ji bo derxistin û paqijkirina şablonê RNA kîtê Foregene Total RNA Isolation Kit) an jî hilbera şkandina nimûneyê (Pêşniyar kirin ku pergala Foregene Lysis bikar bînin), primerên taybetî (10 μM) û malzemeyên din ên têkildar, amûr amade bikin.
2. Tampona 2× Direct RT-qPCR, ddH2O-Bê-RNase û Boyaxa Referansê ya 20× ROX (eger hewce be) bixin nav qutîka bi qeşayê de, vana bi xwezayî bihelînin, û bi nermî tevlihev bikin.
B: Pergala RT-qPCR amade bikin
Nîvê qebareya tampona reaksiyonê ya pergala reaksiyonê bistînin (mînak, heke qebareya pergalê 20 μL be, pêdivî ye ku ew 10 μL 2× Tampona rasterast RT-qPCR bistîne.). Bomîqdara têkildar a enzîmê, em pêşniyar dikinM-MLV: Pergala reaksiyonê ya 10-30 U / 20 μL,TaqADN polymerase：Pergala reaksiyonê ya 1-2 U / 20 μLev pêşniyara me ye, divê hûn wê ceribandin û sererast bikin), şablonê RNA, destpêk û lêkolînên taybetî lê zêde bikin, û ddH-ya Bê-RNase lê zêde bikin.2O heta 20 μL.Amadekirina taybetî ya pergala reaksiyonê ya RT-qPCR dikare li tabloya jêrîn 1 were binav kirin.
Tablo 1: Pergala RT-qPCR amade bikin
| Perçe | Bend | Teqandina dawî |
| 2× Rasterê RT-qPCR Buffer | 10 μL | 1× |
| Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| Primer Pêş (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Reverse Primer (10 μM) | 0,8 μL | 50-900nM |
| Probe (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| Şablon (RNA an Lîsate) | X μL | |
| 20× ROX Reference Dye | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| Tevahiya Volume | 20 μL |
Nîşe: Forward Primer û Reverse Primer primerên taybetî yên gena armanc in.Pergala qPCR dikare li gorî modelên ezmûnî û PCR-ya pratîkî were sererast kirin.Em 400nM ji bo berhevdana dawîn a piraniya primers pêşniyar dikin.Ji kerema xwe, qebareya primerên taybetî û sondajên taybetî li gorî konsantasyona amadekirî û berhevoka dawîn a pêşniyarkirî eyar bikin.
1*: Li gorî amûrên cûda yên PCR-ê yên hêjmarî, berhevoka paşîn a maqûl ya ROX Reference Dye hilbijêrin.Pîvana optîmal a ROX Reference Dye ya amûrên PCR-ya jimarî yên hevpar di tabloya jêrîn de tê destnîşan kirin:
| Amûrên PCR yên mîqdar | Kêmbûna dawî ya ROX Reference Dye |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/Gava Yekem,etc. | 1× (mînak, 1μl 20×ROX Reference Dye di pergala reaksiyonê ya 20 μL de zêde bike) |
| ABI 7500, 7500 Fast, Stratagene Mx3000P, Mx3005P û Mx4000, hwd. | 0.5 × (mînak, 0.5μl 20×ROX Reference Dye di pergala reaksiyonê ya 20 μL de zêde bike) |
| Amûra Roche PCR, Amûra PCR ya Bio-Rad, Amûra PCR ya hejmarî ya Eppendorf, hwd. | Bêyî ROX Reference Dye |
Storage û Refê jiyana
Pêdivî ye ku kît di -20 ± 5℃ de were hilanîn.Pêdivî ye ku tavilê di sarincoka termostatîk -20℃ de were hilanîn.Dema derbasbûnê 2 sal e heke di rewşek guncan de were hilanîn.
